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【摘要】目的探索黃芩的新型提取方法。方法采用紫外分光光度法測(cè)定黃芩苷含量，比較水提法與液-液連續(xù)萃取法對(duì)黃芩苷提取率的差別。結(jié)果水提法與液-液連續(xù)萃取法對(duì)黃芩苷提取率差異有顯著性。結(jié)論液-液連續(xù)萃取法是一種新型高效提取方法。

【關(guān)鍵詞】黃芩；液-液連續(xù)萃取法

【Abstract】ObjectiveTostudyanewextractionmethodforbaicalininradixscutellariae.MethodsUltravioletspectrophotometrymethodwasusedtodeterminethecontentofbaicalin.Theabstractionrateofbaicalinbywaterextractionwascomparedtothatofliquid-liquidcontinuousextractionmethod.ResultsTherewasasignificantdifferencebetweenthetwomethods.ConclusionTheliquid-liquidcontinuousextractionmethodisanewandhighefficiencyseparationmethod.

【Keywords】RadixScutellariae;liquid-liquidcontinuousextractionmethod

黃芩（RadixScutellariaebaicalensis）為唇形科植物黃芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根。具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎之功，用于發(fā)熱煩躁、肺熱咳嗽、瀉痢熱淋、濕熱黃疸、胎動(dòng)不安、癰腫瘡毒等癥［1］。主要有效成分是黃酮類(lèi)：黃芩苷、黃芩苷元、漢黃芩苷、漢黃芩素等。黃芩根中含有黃芩酶，能夠促進(jìn)黃芩苷和漢黃芩苷水解，生成黃芩黃素和漢黃芩黃素，黃芩黃素分子中帶有三個(gè)鄰位的酚羥基，性質(zhì)不穩(wěn)定，容易被氧化轉(zhuǎn)為醌類(lèi)衍生物，質(zhì)量隨之降低［2］。目前黃芩提取方法有水提取酸沉淀法、超聲法、超濾法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等，而常用的為水提取酸沉淀法，但水提取存在黃芩有效成分提取不完全、提取出的雜質(zhì)較多等缺點(diǎn)，因此本文采用液-液雙向萃取法提取黃芩有效成分［3］，并與常用的水提法進(jìn)行比較。

1儀器與試劑

1.1儀器PHS-3C精密pH計(jì)（上海雷磁儀器廠(chǎng)）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52A（上海亞榮生化儀器廠(chǎng)）；SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵（河南省鞏義適英峪儀器廠(chǎng)）；UV1700（日本島津）；BS2245電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；紫外分析儀；超聲清洗儀。

1.2試藥黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)生物制品檢定所）；無(wú)水乙醇、磷酸、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、鹽酸、醋酸、95%乙醇均為分析純，黃芩藥材經(jīng)蘭州大學(xué)藥學(xué)院生藥研究所馬志剛教授鑒定為唇形科植物黃芩（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干燥根，粉碎過(guò)60目篩；磷酸鹽緩沖液自配（以磷酸溶液及磷酸氫二鈉溶液配制pH值為2、3、4、5、6、7的磷酸緩沖液）。

2方法與結(jié)果

2.1黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制［4］精密稱(chēng)取干燥至恒重的黃芩苷對(duì)照品10.29mg，加70%乙醇超聲溶解，定容于50ml容量瓶中。精密量取黃芩苷對(duì)照品液（0.2058mg/ml）0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml分別置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L鹽酸，再加70%乙醇至刻度，搖勻。于276nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，隨行試劑空白。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)?；貧w方程為：Y=0.0551X-0.0021,R2=0.9993（n=6），黃芩苷在4.116～24.696mg/L范圍內(nèi)具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。見(jiàn)圖1。

2.2提取方法

2.2.1液-液雙向萃?。?］精密稱(chēng)取黃芩藥材粉末約5g，以煮沸的pH=2的磷酸緩沖液30ml燙過(guò)，冷卻至38℃左右接入液-液雙向萃取儀中（即圖2中a瓶）。從回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3處，a瓶浸入38℃左右的油浴中，b瓶進(jìn)行加熱攪拌，使乙酸乙酯形成回流。回流提取4h后收集乙酸乙酯液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收乙酸乙酯，藥材提取物備用，同法提取6組。見(jiàn)圖2。

2.2.2普通方法提取精密稱(chēng)取黃芩藥材粉末約5g，提取3次，第一次以10倍量沸水燙過(guò)煎煮2h，第二、三次分別加8倍量水進(jìn)行煎煮，每次1h，合并煎液，濾過(guò)，濾液加2mol/L鹽酸（80℃）調(diào)節(jié)pH值至2保溫1h，靜置24h，濾取沉淀，用水洗至pH5.0，繼用70%乙醇洗滌至pH7.0，低溫干燥，即得，同法提取6組。2.3樣品測(cè)定于樣品提取物中加入少量70%乙醇微熱使溶解，轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，超聲溶解30min，以70%乙醇定容，濾過(guò)，棄去初濾液，精密吸取5.0ml續(xù)濾液以70%乙醇定容于50ml量瓶中,精密吸取1.0ml置于25ml容量瓶中，加入20ml0.2mol/L鹽酸，再加70%乙醇至刻度，搖勻。于276nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

2.4薄層檢視黃芩苷對(duì)照品的70%乙醇溶液作為對(duì)照品溶液、黃芩液-液雙向萃取樣品提取物及普通方法樣品提取物的70%乙醇溶液作為供試品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，以毛細(xì)管吸取上述溶液，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。

2.5提取物含量比較所得含量為每克黃芩藥物中所含的黃芩苷的毫克數(shù)。Levene方差齊性檢驗(yàn)F=4.794，P=0.053>0.05，可認(rèn)為兩總體方差相等。取t=-8.148，df=10，P=0.000<0.05，可認(rèn)為普通提取與液-液雙向萃取所得m提/m藥之間差異有顯著性。見(jiàn)表1。表1兩種提取方法提取黃芩苷的含量對(duì)比

2.6薄層檢視結(jié)果薄層檢視顯示兩種方法提取物的供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

3討論

由上述結(jié)果可以看出筆者所采用的新提取方法液-液雙向萃取法所提取的提取物具有黃酮的特征反應(yīng)，薄層檢視也說(shuō)明此法可提取出黃芩苷等黃酮類(lèi)化合物，經(jīng)SPSS分析可知兩種提取方法的差異有顯著性，即液-液雙向萃取法所得黃芩中總黃酮的含量遠(yuǎn)高于通常采用的水提法，可作為一種高效的黃芩有效成分提取的新方法。

【參考文獻(xiàn)】

1陳柏君.高山林.余國(guó)奠.黃芩及其同屬藥用植物研究進(jìn)展.中國(guó)野生植物資源,2003，18（3）:20-24.

2孫秀英.中藥黃芩的研究概況.中醫(yī)藥信息,1993，5:32-34.

3賀殿，吳勇杰，賈忠，等.液-液連續(xù)萃取方法及裝置：中國(guó)，200410073368.7［P］,2005-08-24.

4黃啟華.紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中黃芩苷的含量.中成藥,2000,22（12）:836.