前言：本站為你精心整理了探研克隆微粒子病檢測(cè)靈敏度辦法范文，希望能為你的創(chuàng)作提供參考價(jià)值，我們的客服老師可以幫助你提供個(gè)性化的參考范文，歡迎咨詢(xún)。

1材料與方法

由浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)院蠶蜂研究所提供，分別設(shè)置103spore/ml、105spore/ml、107spore/ml等3種不同濃度。供試蠶品種：“無(wú)毒”秋豐、白玉原種，由浙江省蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫站提供。供試“無(wú)毒”母蛾：由浙江省蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫站提供一樣本檢驗(yàn)“無(wú)毒”的二樣本蛾盒。飼養(yǎng)和感染供試的“無(wú)毒”秋豐、白玉原種，由浙江省農(nóng)科院蠶桑研究所按DB33/T217.4-2007《桑蠶種繁育規(guī)程》飼養(yǎng)至4齡大眠，提供給浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院添毒用大眠蠶1600條；浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院蠶蜂研究所在5齡起蠶時(shí)，分別添食103spore/ml、105spore/ml、107spore/ml等3種不同濃度的微粒子蟲(chóng)孢子懸浮液。添毒后按常規(guī)方法飼養(yǎng)至化蛹，鑒別雌、雄蠶蛹備用。制種試驗(yàn)區(qū)雌蛹化蛾當(dāng)天下午14~16時(shí)按無(wú)性克隆制種方式摘除輸卵管和蠶卵，摘除輸卵管和蠶卵后的蛾體60℃烘干后備檢。對(duì)照區(qū)雌蛹化蛾后與對(duì)交品種雄蛾交配產(chǎn)卵，產(chǎn)卵的母蛾待自然死亡后60℃烘干備檢。微粒子病靈敏度檢測(cè)將感染母蛾與“無(wú)毒”母蛾以1∶27的比例混合。母蛾鏡檢由浙江省蠶種質(zhì)量檢疫檢驗(yàn)站按DB33/T217.3-2007《桑蠶種母蛾檢疫規(guī)程》3.6規(guī)定的檢疫流程進(jìn)行磨蛾、過(guò)濾、離心、鏡檢，調(diào)查檢出率。以“無(wú)毒”母蛾（28蛾/盒）鏡檢結(jié)果作為陰性對(duì)照數(shù)據(jù)處理使用MicrosoftExcel2003程序，對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，百分?jǐn)?shù)進(jìn)行Sin-1（P）1/2轉(zhuǎn)換。

2結(jié)果與分析

不同制種方式的母蛾微粒子病檢出率將雌蠶無(wú)性克?。ㄔ囼?yàn)區(qū)）和常規(guī)交配制種（對(duì)照區(qū)）的母蛾微粒子病檢出率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析2.2不同制種方式的母蛾微粒子病檢出率方差分析對(duì)不同制種方式、不同感染濃度母蛾微粒子病檢出率作無(wú)重復(fù)雙因素方差分析。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，不同感染劑量對(duì)母蛾微粒子病檢出率影響顯著：F（劑量）=13.494＜Fcri（t臨界值）=5.143P（概率）=0.006＜0.01而不同制種方式對(duì)母蛾微粒子病檢出率沒(méi)有表現(xiàn)出明顯差異：F（制種方式）=1.828＜Fcri（t臨界值）=4.757P（概率）=0.242＞0.05綜合以上檢測(cè)數(shù)據(jù)，可以發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)區(qū)與對(duì)照區(qū)的微粒子病檢出率沒(méi)有顯著差異，說(shuō)明摘除卵管和蠶卵的母蛾對(duì)微粒子病的檢疫沒(méi)有產(chǎn)生不良影響。

3討論

本次試驗(yàn)表明，雌蠶無(wú)性克隆和常規(guī)交配制種條件下的母蛾微粒子病檢出率沒(méi)有顯著差異，說(shuō)明雌蠶無(wú)性克隆繁殖方式下的母蛾對(duì)微粒子病的檢疫沒(méi)有產(chǎn)生不良影響。母蛾只要受到微粒子病感染，按1：27的比例混合，即使摘除卵管和蠶卵，其檢測(cè)靈敏度也是足夠的。不同感染劑量對(duì)微粒子病檢出率有顯著差異，暗示了不同感染劑量對(duì)母蛾感染率有顯著影響，添食劑量達(dá)到一定濃度，母蛾100%感染。以上結(jié)果為制定雌蠶無(wú)性克隆系原種檢疫標(biāo)準(zhǔn)提供相關(guān)的數(shù)據(jù)。

作者：徐杰魯興萌單位:浙江省蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫站