前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇李白的古詩范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。

李白的古詩范文第1篇

李白乘舟將欲行，忽聞岸上踏歌聲。

桃花潭水深千尺，不及汪倫送我情。

2、《望廬山瀑布》

日照香爐生紫煙，遙看瀑布掛前川。

飛流直下三千尺，疑是銀河落九天。

3、《渡荊門送別》

渡遠荊門外，來從楚國游。

山隨平野盡，江入大荒流。

月下飛天境，云生結海樓。

仍憐故鄉(xiāng)水，萬里送行舟。

4、《送友人》

青山橫北郭，白水繞東城。

此地一為別，孤蓬萬里征。

浮云游子意，落日故人情。

揮手自茲去，蕭蕭班馬鳴。

5、《送孟浩然之廣陵》

故人西辭黃鶴樓，煙花三月下?lián)P州。

孤帆遠影碧山盡，唯見長江天際流。

6、《靜夜思》

床前看月光，疑是地上霜。

舉頭望山月，低頭思故鄉(xiāng)。

7、《早發(fā)白帝城》

朝辭白帝彩云間，千里江陵一日還。

兩岸猿聲啼不住，輕舟已過萬重山。

8、《登金陵鳳凰臺》

鳳凰臺上鳳凰游，鳳去臺空江自流。

吳宮花草埋幽徑，晉代衣冠成古丘。

三山半落青天外，二水中分白鷺洲。

總為浮云能蔽日，長安不見使人愁。

9、《夜宿山寺》

危樓高百尺，手可摘星辰。

不敢高聲語，恐驚天上人。

10、《秋登宣城謝眺北樓》

江城如畫里，山曉望晴空。

兩水夾明鏡，雙橋落彩虹。

人煙寒橘柚，秋色老梧桐。

李白的古詩范文第2篇

李白的故鄉(xiāng)到底是哪里的解答如下：

李白的故鄉(xiāng)是綿州昌隆縣青蓮場，今屬四川江油市，其祖籍位于隴西成紀，今甘肅秦安；李白，字太白，號青蓮居士，又號謫仙人，是唐代偉大的浪漫主義詩人，被后人譽為詩仙，與杜甫并稱為李杜；江油市是中國優(yōu)秀衛(wèi)生城市、全國優(yōu)秀旅游城市，具有李白故里、華夏詩城、蜀道咽喉、九寨門戶、中國火藥之鄉(xiāng)的美譽。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

李白的古詩范文第3篇

內容提要

19世紀是第一個科學的世紀，20世紀是第二個科學的世紀?？茖W的社會化和社會的科學化是科學的世紀里兩個基本的標志。本文主要闡述20世紀是如何完成科學的社會化和社會的科學化的。

一、世界圖景的重建

二、超級能量的開發(fā)

20世紀不但在理論科學方面出現(xiàn)了革命性的成果，而且在技術方面更是取得了人類有史以來最令人震驚的成就。只有在講技術時，我們才真正地領悟到，科學與社會之間一些復雜的關聯(lián)。

我們先來講一講核能量的開發(fā)。核能量的開發(fā)非常典型地表達了科學的社會功能、科學與社會之間的相互作用、相互關系。核能的開發(fā)直接根源于核物理學的發(fā)展，沒有核物理學就絕無可能有核能量的開發(fā)。而核物理學、粒子物理學、高能物理學，都奠定在20世紀初相對論和量子力學的革命之上。因此，從某種意義上說核能的釋放是20世紀前期物理學大發(fā)展的一個必然的產物。核物理學發(fā)展早期的人并沒有意識到，核能量真的可以開發(fā)。當時的一些新聞記者問愛因斯坦，E=MC2這個公式意味著質量的微小損失就可以帶來大量的能量，你覺得它將來能不能造福于人類。愛因斯坦說這根本不可能，完全只是理論上的可能性。愛因斯坦這樣的偉人都沒有意識到，其實核能的開發(fā)已經近在眼前。早期的一些量子力學家像尼爾斯?玻爾這些人，也都沒有意識到這一點，英國的盧瑟福也都認為核能的開發(fā)是不可能的。

但是事情進展很快，到了20世紀30年代初期的時候，核裂變以及通過高能粒子轟擊造成鏈式反應的機會就有了。鏈式反應就是指用一個高能粒子撞擊一個核，撞的過程中損失一定的質量帶來巨大的能量，撞擊的結果是出現(xiàn)了更多的適合做轟擊炮彈的粒子去轟別的核，這樣一來就像滾雪球一樣，轟擊過程越鬧越大。這個鏈式反應一旦成立，核能的釋放和開發(fā)就成為可能。大家知道，20世紀30年代初正好是二次世界大戰(zhàn)的前夜，那時候希特勒剛剛上臺不久，叫嚷要振興德意志民族，排斥猶太人，叫囂著要報仇雪恨，因為他們第一次世界大戰(zhàn)打輸了。當時的人們很擔心，因為當時德國的物理學非常發(fā)達，可以說是世界第一物理學強國，所以歐洲其它國家的物理學家就很擔心，實驗室里核能的釋放最終可能會變成核武器，而德國人優(yōu)先擁有這個武器對人類來說不是個好事。所以當時就有科學家很著急，希望物理學家是不是能夠放慢研究的速度。放慢一點科學研究的步子，這是人類歷史上第一次科學家主動站出來說的。過去認為科學總是好的，科學總是在造福于人類的，科學家總是在做好事，我們要把它做得越快越好?？墒呛四艿尼尫乓婚_始就遭遇了這么一個難題，當時就怕被壞人所利用，所以反而希望不要搞或者搞慢一點。但是這個設想沒有得到認可，因為近代科學的一個基本的原則就是學術自由、出版自由、研究自由。研究沒有，不能夠輕易破壞這個自由研究的原則，所以核物理學還在飛速地發(fā)展，特別是那些德國物理學家都很厲害。轉眼間就到了20世紀30年代中期了，納粹排猶更加厲害，很多有猶太血統(tǒng)的或者背景的物理學家都跑了，大部分跑到美國去了。愛因斯坦也跑到美國去了。美國人在戰(zhàn)后之所以成為世界強國，很大程度上是發(fā)了戰(zhàn)爭大財，特別是發(fā)了人才財，希特勒把一些優(yōu)秀的科學家都擠到美國去了，所以美國戰(zhàn)后立即成為世界的科學強國。當時一些科學家到了美國之后，繼續(xù)擔心德國人會搶先把這個核武器造出來，就希望美國人也抓緊造。美國人如果抓緊先造出來的話，就可以遏制德國人。但是核武器是個新玩意兒，誰都搞不清是個什么東西。美國當時的羅斯?？偨y(tǒng)也搞不清楚。那時候馬上要打仗，國家的事情很多，所以那位希望美國人盡快研制原子彈的匈牙利籍猶太物理學家希拉德就到處找人簽名。他先找愛因斯坦，愛因斯坦那時候已經到了美國，他的名氣很大，而且他也很爽快地簽了。有人說愛因斯坦是原子彈之父，其實算不上，他那個質能轉化公式離造核武器還遠著呢，至于他在信上簽了名，其實那封信并沒有引起美國總統(tǒng)的注意。那個時候愛因斯坦整天給人簽名，因為一大批猶太人跑到美國去，找不到工作找不到地方住，他們聽說猶太人中最偉大的是愛因斯坦，所以他們都去找愛因斯坦簽名寫信，幫助改善生活條件。愛因斯坦是所有人找他簽名他都簽，所以他那封寫給美國總統(tǒng)的建議制造原子彈的信并沒有真正地起到什么效果。

后來真正起到效果的是美國的總統(tǒng)科學顧問去跟羅斯福講了一個故事，他說當年有一個美國的發(fā)明家叫富爾敦，就是汽船的發(fā)明者。他當時到法國去發(fā)展，想找拿破侖拿一筆錢去開發(fā)他那個新型的用蒸汽機驅動的輪船，拿破侖覺得用機器來驅動船不太可能，作為一個軍事老手，他知道軍艦是跟天氣有關的，可富爾敦跟他說你要是買了我這個船，將來這個軍艦風雨無阻，想到哪去就到哪去，想什么時候走就什么時候走，拿破侖不信，沒有資助他。這位總統(tǒng)顧問就跟羅斯福講了這個故事，說你看看由于軍事家、政治家缺乏遠見、缺乏想象力，結果就沒有把蒸汽機用在軍艦在，你設想一下如果當年拿破侖用了富爾敦這個軍艦的話，那英國很可能就沒了，現(xiàn)在的世界格局就完全不一樣了。這個故事打動了羅斯福總統(tǒng)，羅斯福當即就說立即上馬這個事。這就是大家知道的著名的曼哈頓工程。

曼哈頓工程大體分成三個部分。第一個部分是物理學家去搞反應堆，即可控的鏈式反應。你得讓它反應起來，還要可以控制，別最后不可控制把整個地球都炸了就不行了，必須把它控制住，讓它反應它就反應，讓它不反應它就不反應。這個事情是在芝加哥大學由一位來自意大利的物理學家叫做費米的來主持。第二個工作就是要提純大量的鈾，鈾就是用來做核武器的原料。天然的鈾礦不純，需要把它提純。做個炸彈不能搞得像個樓那么大不行，要做小一點，做小一點就必須有很純的鈾。據(jù)說為了鈾的提純，當時花了美國當時全國電力的三分之一。為了造一個核武器，把美國一個國家的用電量三分之一都耗掉了，可以想像造這個核武器是一個大規(guī)模的協(xié)作行為。沒有政府的投資，沒有政府下那么大決心，是不可能做出來的。第三個部分就是組裝炸彈。當時一下子造了三顆炸彈出來，第一顆炸彈先在戈壁上試爆了一下，結果威力無比，當時的核物理學家都嚇得渾身發(fā)抖，腿都軟了，沒想到能量這么大。

這個核武器造出來的時候，時已經到了1945年初，這時的德國已經不行了。盟軍的特工到了德國境內去偵查他們的核武器的研制點，發(fā)現(xiàn)德國人根本搞不出來。這個消息傳回美國之后，美國科學家就慌了，說過去我們造核武器是怕德國人搶了先，我們要遏制它。現(xiàn)在知道了德國人根本造不出來，我們還造不造那個核武器呢？物理學家多數(shù)說不造了，可是國家不同意，現(xiàn)在由不得你了，我們美國已經花了這么多錢、花了這么多人力物力，全國那么多電力都被你耗掉了，現(xiàn)在不造也得造了。科學一旦引入政治和軍事領域，科學家的發(fā)言權變得很有限了。結果還是造出來了。造出來以后又爭論，究竟要不要扔這個東西。當時的科學家都說我們是不是不要扔了，能不能組織全世界的人來看一下，威懾一下就行了，看看能量有多大。美國說不行，試爆了一個之后威力確實很大。當時德國已經垮掉了，德國是大概五月份就投降了，但日本還很厲害，還在頑強地抵抗。在太平洋的諸島上美日之間是一個一個地角逐。雖然當時的科學家們反對對日使用核武器，但軍方說我們的美國青年每天都在對日前線上犧牲，早一點投核武器對我們是有好處的，可以早一點結束戰(zhàn)爭。結果美國就了一個最后通牒，通牒說得也比較含糊，說你再不投降我就給你毀滅性打擊，沒有說毀滅性打擊是什么意思。日本人當時當然不聽它這一套。美國就在1945年8月6號在廣島投了第一顆原子彈。投了之后日本國內也有核物理學家，就派人到廣島去勘察究竟是不是核武器。他一去就知道是核武器，當時就嚇壞了，但消息尚未及時地返回來。日本軍方還是很強硬的不肯投降。結果三天之后又在長崎投了一顆。這顆投下去之后，日本天皇立馬就接受了無條件投降。

核武器的研制到運用的過程中可以看到科學技術和社會中包含著多種各種因素，犬牙交錯在一起。核武器出現(xiàn)了以后，立即變成了一種超級能量，并且最終轉化為一種政治權力。所以戰(zhàn)后各國競相研制核武器。所謂核軍備競賽，就是美蘇兩個超級大國之間為爭奪世界霸主搞的。誰掌握的核能量越多，他就越厲害。我們中國也是要研制核武器，兩彈一星里面有一彈就是核彈，包括原子彈和氫彈。過去那個時候聯(lián)合國安理會五個常任理事國，正好是五個有核國家。你沒有核武器根本就沒有發(fā)言權。有了核武器之后，我們才真正成為一個大國，才真正成為一個在安理會有發(fā)言權的國家。許多海外華僑聽說我們核武器研制成功，那是非常激動的。知識就是力量，科學就是力量，這一點在20世紀表現(xiàn)得最充分。核能量的開發(fā)充分表達了科學成為一種超級能量的這個過程。

講完核武器，我們再講講航空航天計劃。重要的科技進展都和戰(zhàn)爭有關系，這一點是耐人尋味的。航天計劃也是和二戰(zhàn)之后的冷戰(zhàn)有關系。二戰(zhàn)之后沒有出現(xiàn)第三次世界大戰(zhàn)，但有冷戰(zhàn)。只有局部的熱戰(zhàn)，越南戰(zhàn)爭、朝鮮戰(zhàn)爭等都是局部的熱戰(zhàn)。冷戰(zhàn)就是互相背對背，也不喊打，但是都互相較勁。冷戰(zhàn)里面最重要的一個工程就是――阿波羅計劃。阿波羅計劃就是登月計劃，是一項重大的航天計劃。美國在二戰(zhàn)之后有了核武器，又有了高速飛機，挺揚揚得意的，開始時對這個火箭不是十分關心。航天需要火箭，因為普通的飛機是在空氣里運動?？諝庥袃蓚€用途，第一個是提供浮力，飛機靠兩個大翅膀可以浮在空中；第二個空氣可以作為助燃劑燃燒。但是進入太空就沒有空氣了，靠飛機是不行的，需要火箭。火箭技術最厲害的本來也是德國，德國人馮?布勞恩是一個火箭奇才，20來歲就成為德國火箭總監(jiān)。馮?布勞恩在二戰(zhàn)時期其實為德國也立了功，當時德國V2火箭打英國，把英國人打得沒有辦法。那個火箭太厲害了，射程又遠，大炮通常的射程也就幾十公里，火箭幾百公里就打過去了，沒法防。所以當時V2火箭給德軍的垂死掙扎打了一針強心劑。當然德國最終是失敗了。德國失敗以后，蘇聯(lián)人想起找火箭，結果把火箭工廠包圍了，但馮，布勞恩跑掉了。蘇聯(lián)人就把那些東西都給繳獲了運回蘇聯(lián)。美國這邊更厲害，他把人給抓住了。美國把人抓住以后也是運回美國。德國人有一個特點，他就是職業(yè)化程度很高，給誰干都是干。所以馮，布勞恩到了美國之后，很快就效忠美國幫美國干。開始美國人不重視那個火箭技術，又讓蘇聯(lián)占了先。我們知道第一顆人造地球衛(wèi)星、第一次載人上天都是蘇聯(lián)人占先的。美國人后來意識到了問題的嚴重性，所以也緊追不舍，開始是蘇聯(lián)一直占先。但是美國畢竟實力雄厚，財力、物力、人力都很雄厚。在蘇聯(lián)人把加加林送上太空又把他安全運回來之后，美國國內一片嘩然，納稅人紛紛譴責政府。當然那時候把人送上天又送回來比較簡單，加加林回來的時候是所有的東西都不要了，飛船火箭全部扔掉，他自己是坐降落傘回來的。但是即使這樣的話他的壯舉也證明了蘇聯(lián)的太空技術是最厲害的。所以當時的美國總統(tǒng)肯尼迪就發(fā)狠，加加林回來之后一個多月后，他馬上宣布美國要在十年之內把一個美國人送上月球，而且讓他安全回來，借此平息一下民間的憤怒，于是就上馬了著名的阿波羅計劃。

阿波羅計劃分幾步走。最終是沒花10年，從1961年到1969年，8年時間它就實現(xiàn)這個計劃了，宇航員柯林斯、阿姆斯特朗還有阿爾德林三個人完成了人類首次的登月任務?？铝炙柜{著飛船在天上等著，奧爾德林和阿姆斯特朗兩人就下去了，阿姆斯特朗第一個踏上了月球的土地。他后來說了一句名言：這一步對一個人來說是一小步，對人類是一次飛躍。這次登月之后，美國又有好幾次登月活動。蘇聯(lián)為什么后來始終沒有上去，是它的火箭技術始終不太過關，經費消耗太大也是一個原因。我們看到了，阿波羅計劃一方面是高科技，另一方面是高耗費，沒有國家的支持和介入，這么龐大的工程根本就搞不下去。最近有人懷疑美國人登月是假的。我看這個懷疑是值得懷疑的。你想騙一個人是容易的，騙一群人是難的；你想在短期內騙一群人是容易的，在長期內騙一群人是很難的，所以我想，說它是假的證據(jù)應該是不足的。

大家可以注意到，這兩次超級能力的開發(fā)有幾個共同的特點。第一個它是與科學理論上的高度發(fā)展直接相關的，核物理學尤其典型。第二個它是與政府和國家的大力支持密不可分，沒有國家的力量的介入是根本不可能的。國家為什么會卷入這個事情，也是與這個超級能量本身就代表著這個國家的實力。所以今天的科學技術已經不單純是一個科學家個人的事情，而是一個國家一個民族一個社會的事情。每一個公民都有權力、都有義務來參加這個科技決策，參加關于科技發(fā)展戰(zhàn)略的一些討論和思考。這是我們就這個問題所獲得的一個結論。

三、生活世界的重塑

我們最后來講一講目前還在方興未艾的生物技術和信息技術。生物技術剛才說過了，來源于DNA雙螺旋模型的建立，它本身也代表了物理學思維向生命科學的一種擴張。目前所采用的生物技術基本上都在使用物理學的方法，用的是還原論的方法，用的是拼和拆的方法。生命雖說是一個整體，但今天的生命科學仍然想嘗試一下機械的方法，對它進行拼裝?，F(xiàn)在的基因重組、基因移植、基因復制，統(tǒng)統(tǒng)都是按照機械論的方案來進行的，很有效而且很有用。但是另一方面，生命技術的出現(xiàn)也遭遇一個很大的問題，就是會挑戰(zhàn)我們日常的一些價值觀。我們可以舉幾個例子來說明。像勇敢、頑強、勤奮都是很好的道德價值，可是現(xiàn)在突然有生命技術告訴你，說那個玩意兒可能和你是否努力沒關系，可能是你基因造成的，這樣一來，就瓦解了我們這些倫理價值。過去我們崇拜一個人特別勇敢，后來發(fā)現(xiàn)沒什么可崇拜的，就是基因好。如果我能夠把自己的基因改一改，我也能變得勇敢。包括基因技術在內的所謂生命擴展術，肯定會挑戰(zhàn)一大堆我們通常所說的倫理上的東西。過去贊揚人的后天努力具有可貴的道德價值，比如說一個人笨鳥先飛，雖然笨但是很勤奮，一樣可以取得很好的成就。在生命擴展技術看來，改一改笨基因就可以實現(xiàn)這個目標。所以一個尖銳的問題擺在人類的面前：是不是我們僅僅通過基因修補術，廣義地說，一切高技術，就能解決人類的所有問題。過去人類引以自豪的各種各樣道德高尚的東西還有沒有用？會不會有一天，你的孩子回家哭著跟你說，我的同學基因都2.3版本了，我才1.5，趕緊花錢給我刷新吧，再不刷新，我的學習成績不好別怪我。當然現(xiàn)在我們講這個故事仍然是未雨綢繆，但它的可能性已經很清楚了。因此，我們要在發(fā)展基因技術過程中及時地調整、及時地為這些難題的到來做準備。

李白的古詩范文第4篇

羊骨頭湯里面的白色主要是脂肪，湯熬成濃白色，主要是脂肪的“功勞”；加熱過程中，脂肪被乳化，形成穩(wěn)定的脂肪小液滴懸在水中，湯就呈現(xiàn)出乳白色了，通常脂肪越多湯越白。所以常喝這種湯很容易長胖。

骨頭湯的主要原料羊骨，富含蛋白質，脂肪，維生素和鈣質等多種為人體所吸收的營養(yǎng)成分，以其烹制而成的湯富含營養(yǎng)精華。

（來源：文章屋網(wǎng) ）

李白的古詩范文第5篇

【關鍵詞】 骨肉瘤； 百里醌； 轉移

【Abstract】 Objective：To investigate the anti-metastasis effect and its mechanism of thymoquinone on the osteosarcoma SaOS-2 cell line in vitro.Method：In the study，after application of different concentrations of thymoquinone in the role of human osteosarcoma SaOS-2 cells，the effects of thymoquinone on the migration and invasion of osteosarcoma SaOS-2 cells were examined by using wound assay and matrigel counting.Western blotting was used to detect the protein expression of MMP-2 and MMP-9 in SaOS-2 cells.Result：Thymoquinone significantly suppressed the migration and invasion of osteosarcoma SaOS-2 cells in a concentration depended manner.The expression of MMP-2 and MMP-9 were down-regulated in osteosarcoma SaOS-2 cells after treatment of thymoquinone.Conclusion：Thymoquinone exerts anti-metastatic activity in SaOS-2 cells in vitro，which may be achieved by down-regulating the expression of MMP-2 and MMP-9.

【Key words】 Osteosarcoma； Thymoquinone； Metastasis

First-author’s address：The First People’s Hospital of Yueyang，Yueyang 414000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.05.007

百里醌（Oridonin）是從唇形科（Labtea）香茶菜屬（Rabdosia）植物中分離出的一種貝殼杉烯二萜類（ent-kaurene diterpenoid）天然有機化合物，目前研究結果表明，百里醌能夠抑制如前列腺癌、宮頸癌、肝癌和肺癌等多種腫瘤細胞增殖，并對細胞轉移有一定抑制作用[1-6]。但目前尚未有百里醌對骨肉瘤轉移的抑制作用的研究報道，為此本研究將觀察百里醌對體外人骨肉瘤細胞轉移的作用，并初步探討其可能機制。

1 材料與方法

1.1 主要藥品和試劑 胰酶、胎牛血清和RPMI-1640培養(yǎng)基購自美國Gibco公司；MMP-2、MMP-9和β-actin抗體購自美國Epitomics公司；Transwell小室購自美國Corning公司；BCA蛋白濃度測定試劑盒和結晶紫染色試劑盒購自南京凱基生物技術有限公司；人工重組基底膜（matrigel）和百里醌購自美國Sigma公司，百里醌用含30%DMSO的滅菌三蒸水配成5 mmol/L母液，置-20 ℃保存，應用時加RPMI-1640培養(yǎng)基稀釋成目標濃度（DMSO的終濃度

1.2 細胞株及細胞培養(yǎng) 人骨肉瘤細胞株SaOS-2購自ATCC，培養(yǎng)在含l0%胎牛血清、質量濃度1×105 U/L青霉素和100 mg/L鏈霉素、2 mmol/L谷氨酰胺和1.5 g/L碳酸氫鈉的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置于37 ℃、5%的CO2的培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，2～3 d換液1次，細胞單層貼壁生長至70%～80%融合時胰蛋白酶消化傳代。

1.3 細胞遷移實驗 將對數(shù)生長期的SaOS-2細胞制成單細胞懸液，不同濃度百里醌（10、20、

40 μmol/L）作用2 h后，在培養(yǎng)皿上用200 μL槍頭小心刮出2 mm×2 cm 刮痕，經PBS沖洗2次，在顯微鏡下見刮痕內無細胞殘留后放置培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)24 h，置于倒置顯微鏡下觀察細胞劃痕并計算各組細胞的劃痕修復率，實驗重復3次，取平均值。劃痕修復率（%）=[（0 h劃痕寬度-24 h劃痕寬度）/0 h劃痕寬度]×100%。

1.4 細胞侵襲實驗 不同濃度百里醌（10、20、40 μmol/L）作用骨肉瘤細胞2 h后，用無血清RPMI-1640培養(yǎng)基將細胞制成單細胞懸液，取1×104個細胞置于Transwell小室的上室，下層加500 μL含20%胎牛血清的培養(yǎng)基，放置細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后取出濾膜，用棉簽小心擦去小室內膜上未穿過膜的細胞，細胞固定后用結晶紫染色，置于倒置顯微鏡下觀察染色后的細胞并計數(shù)，隨機計數(shù)20個視野，計算平均值。

1.5 Western印跡檢測細胞中MMP-2和MMP-9的表達 裂解細胞并分離細胞蛋白質，用Bradford法測量蛋白濃度后取等量蛋白質樣品（20 μg/孔），常規(guī)8% SDS-PAGE電泳，半干轉膜儀轉膜，5%脫脂奶粉封閉，加入特異性一抗（1∶1000）于4 ℃下孵育過夜，HRP標記的羊抗兔IgG為第二抗體（1∶2500）室溫孵育1 h，ECL顯色，條帶曝光強度用Quantity One 4.6.2（BIO，RAD）軟件分析，以β-actin為內參，通過與內參的灰度比得出目的條帶的相對表達水平。

1.6 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 11.0軟件包進行統(tǒng)計學處理，計量資料用（x±s）表示，正態(tài)分布變量多組間比較用方差分析，兩組間比較用t檢驗，以P

2 結果

2.1 百里醌對體外骨肉瘤細胞遷移的作用 百里醌可呈濃度依賴性顯著抑制SaOS-2細胞遷移（圖1）。百里醌（10、20、40 μmol/L）作用SaOS-2細胞2 h后，細胞劃痕修復率分別為（65.42±7.82）%、（52.66±6.37）%和（40.95±5.37）%，與對照組的（86.05±8.34）%相比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P

2.2 百里醌對體外骨肉瘤細胞侵襲的作用 百里醌可呈濃度依賴性抑制體外骨肉瘤SaOS-2細胞侵襲（圖2）。百里醌（10、20、40 μmol/L）處理SaOS-2細胞2 h后每高倍鏡（×200）下侵襲細胞數(shù)分別為（21.5±3.8）、（22.9±2.8）和（17.5±3.1），與對照組的（45.4±5.7）相比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P

2.3 百里醌對SaOS-2細胞中MMP-2和MMP-9表達的影響 如圖3所示，不同濃度百里醌（10、20、40 μmol/L）作用SaOS-2細胞48 h后，Western印跡表明，相對較低濃度（10 μmol/L）的百里醌對SaOS-2細胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表達無明顯影響，但高濃度（20～40 μmol/L）的百里醌作用SaOS-2細胞后，細胞中MMP-2和MMP-9蛋白表達水平開始下調，以40 μmol/L百里醌作用后對MMP-2和MMP-9蛋白表達下調效應最顯著。

3 討論

在本研究中，為檢驗百里醌對體外骨肉瘤細胞轉移的抑制作用，筆者采用劃痕試驗和Transwell小室試驗模擬骨肉瘤細胞體外轉移過程，結果表明在本次實驗濃度和實驗時間下的百里醌未表現(xiàn)出對骨肉瘤SaOS-2細胞明顯的增值抑制作用，與文獻[7]報道相符，同時在該濃度和作用時間內百里醌可明顯抑制SaOS-2細胞的體外遷移運動和侵襲行為，從而首次在體外實驗中驗證了百里醌抗骨肉瘤細胞轉移的效應，表明百里醌作為一種低毒高效的腫瘤轉移抑制劑應用于骨肉瘤治療的巨大前景。

腫瘤轉移是一個十分復雜的動態(tài)連續(xù)的過程，三步驟學說是當前腫瘤轉移的權威學說 [8-11]，三步驟包括如下，（1）分離：腫瘤細胞之間黏附能力下降，腫瘤細胞開始脫離原發(fā)灶；（2）降解：腫瘤細胞開始分泌水解酶，從而降解細胞外基質（ECM）成分以及基底膜中的蛋白成分；（3）移動：癌細胞通過水解基底膜后形成的組織間隙從而向周圍組織浸潤甚至進入淋巴管和/或血管，最終實現(xiàn)遠處轉移。在腫瘤轉移的過程中，細胞穿過細胞外基質從而實現(xiàn)腫瘤細胞侵襲是腫瘤轉移過程中最重要的環(huán)節(jié)，而基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是在細胞侵襲和遠處轉移等多種惡性生物學行為中發(fā)揮了關鍵作用，MMP-2和MMP-9作為MMPs家族中最重要的成員，在正常生理條件下，MMP-2和MMP-9蛋白能夠降解細胞外基質成分，調節(jié)細胞間黏附，同時MMP-2和MMP-9蛋白還可作用于細胞外成分或其他蛋白成分而啟動其潛在生物學功能，并直接或間接參與胚胎發(fā)育、組織模型再塑及創(chuàng)傷修復等正常生理功能。在病理情況下，MMP-2和MMP-9蛋白可破壞基底膜成分和降解細胞外基質中膠原成分，使得腫瘤細胞突破原發(fā)部位正常基底膜而發(fā)生侵襲和轉移[12-15]。MMP-2和MMP-9在腫瘤細胞中過度表達并分解細胞外基質，使腫瘤細胞向深層組織浸潤并突破血管和淋巴管而進入相應管腔中，造成惡性腫瘤的血行和淋巴轉移，同時MMP-2和MMP-9蛋白還可以調控血管內皮生長因子（VEGF），從而在促進血管生成中發(fā)揮了一定作用。因此，抑制MMP-2和MMP-9的表達能有效抑制惡性腫瘤轉移。在本研究中，百里醌可抑制MMP-2和MMP-9蛋白在體外SaOS-2細胞中表達，同時百里醌對體外SaOS-2細胞遷移和侵襲有顯著的抑制作用，從而提示百里醌可能部分通過抑制MMP-2和MMP-9的表達從而抑制SaOS-2細胞轉移。

總之，本次實驗結果表明百里醌可顯著抑制體外SaOS-2細胞轉移，同時百里醌還可以抑制MMP-2和MMP-9蛋白在SaOS-2細胞中的表達。因此，筆者推斷百里醌可能通過抑制MMP-2和MMP-9從而抑制體外SaOS-2細胞轉移，但還需大量工作研究百里醌抑制SaOS-2細胞轉移的更多機制。

參考文獻

[1] Ikezoe T，Chen S S，Heber D，et al.Baicalin is a major component of PC-SPES which inhibits the proliferation of human cancer cells via apoptosis and cell cycle arrest[J].Prostate，2001，49（4）：285-292.

[2]崔僑，田代真一，小野寺敏，等.百里醌通過誘導人宮頸癌HeLa細胞自噬下調凋亡[J].藥學學報，2007，42（1）：35-39.

[3] Zhang J F，Liu J J，Liu P Q，et al.Oridonin inhibits cell growth by induction of apoptosis on human hepatocelluar carcinoma BEL-7402 cells[J].Hepatol Res，2006，35（2）：104-110.

[4] Leung C H，Grill S P，Lam W，et al.Novel mechanism of inhibition of nuclear factor-kappa B DNA-binding activity by diterpenoids isolated from Isodon rubescens[J].Mol Pharmacol，2005，68（2）：286-297.

[5] Ahmad I，Muneer K M，Tamimi I A，et al.Thymoquinone suppresses metastasis of melanoma cells by inhibition of NLRP3 inflammasome[J].Toxicol Appl Pharmacol，2013，270（1）：70-76.

[6] Torres M P，Ponnusamy M P，Chakraborty S，et al.Effects of thymoquinone in the expression of mucin 4 in pancreatic cancer cells：implications for the development of novel cancer therapies[J].Mol Cancer Ther，2010，9（5）：1419-1431.

[7] Li X T，Lin C，Li P Y.Characteristics of the cytostatic effects of oridonin in vitro[J].Acta Pharmacol Sin，1986，7（4）：361-363.

[8] Cavallaro U，Christofori G.Multitasking in tumor progression：signaling functions of cell adhesion molecules[J].Ann N Y Acad Sci，2004，1（1014）：58-66.

[9]安愛軍，鄭永剛，曹晶杰，等.三種雙膦酸鹽治療惡性腫瘤骨轉移骨痛的成本-效果分析[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2013，10（22）：57-58.

[10]常娜，吳韋煒，徐成勝，等.重組人p53腺病毒聯(lián)合化療治療頸部轉移癌的臨床療效觀察[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2013，10（17）：3-4.

[11]陳寶玉，張鳴竹，房振羽.放療聯(lián)合唑來膦酸治療骨轉移癌止痛療效分析[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2013，10（9）：118-119.

[12] Yamamoto A，Yano S，Shiraga M，et al.A third-generation matrix metalloproteinase （MMP） inhibitor （ONO-4817） combined with docetaxel suppresses progression of lung micrometastasis of MMP-expressing tumor cells in nude mice[J].Int J Cancer，2003，103（6）：822-828.

[13]仲肖靜，顏麗麗.子宮內膜腺癌中MMP-2、MMP-9表達的免疫組化研究[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2014，11（9）：48-50.

[14]王君，羅秋燕，邊文玲，等.紅花注射液保存人胎羊膜對大鼠皮膚切創(chuàng)愈合中MMP-2，MMP-9影響的研究[J].中國醫(yī)學創(chuàng)新，2013，10（18）：1-3.