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乳鐵蛋白范文第1篇

關(guān)鍵詞 乳鐵蛋白；高效液相色譜法；肝素親和柱

中圖分類號(hào) TS252.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2013）16-0291-02

乳鐵蛋白是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外開發(fā)研究速度最快的一種營(yíng)養(yǎng)添加劑，由于其具有廣譜抗菌、抗病毒感染、調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵平衡、調(diào)解骨髓細(xì)胞的生成、抑制人體腫瘤細(xì)胞、同多種抗生素及抗真菌制劑協(xié)同有效治療疾病等功效，使其產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外乳制品加工中的應(yīng)用范圍日益廣泛[1-3]。我國(guó)《食品營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑使用標(biāo)準(zhǔn)（GB14880-2012）》中規(guī)定嬰幼兒配方食品中乳鐵蛋白的最大允許使用量為1.0 g/kg，而目前國(guó)內(nèi)外未建立與乳制品中乳鐵蛋白測(cè)定相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。為保證乳鐵蛋白的安全生產(chǎn)和使用，該文建立了乳制品中乳鐵蛋白的檢測(cè)方法，最大限度地保證市場(chǎng)中乳鐵蛋白添加型產(chǎn)品的安全和質(zhì)量水平，以保證乳制品安全，促進(jìn)行業(yè)健康發(fā)展[4]。

1 材料與方法

1.1 供試材料、試劑與儀器

1.1.1 供試材料。供試材料為嬰幼兒配方奶粉、嬰幼兒配方米粉、成人配方奶粉。

1.1.2 試劑與儀器。Agilent 1200 高效液相色譜儀，配有二極管陣列檢測(cè)器。肝素親和柱（美國(guó)通用醫(yī)藥有限公司）。乙腈（色譜純，美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品），無(wú)水乙醇、氯化鈉、磷酸、磷酸氫二鈉、三氟乙酸（分析級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品）。超純水Nanopure Life Science（賽默飛世爾科技有限公司）。離心機(jī)Jouan Ceterifuge MR23i（賽默飛世爾科技有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 提取試劑的選擇。在相同試驗(yàn)條件下分別以水和磷酸緩沖液作為提取試劑，測(cè)定樣品加標(biāo)回收率，比較水和磷酸緩沖液對(duì)樣品中乳鐵蛋白的提取效果。

1.2.2 提取溫度的選擇。乳鐵蛋白分子量為80 kDa，是具有大約700個(gè)氨基酸殘基序列的單體糖蛋白，并連接1～2個(gè)配糖體。對(duì)于這一類大分子量的蛋白質(zhì)，提取溶劑溫度過(guò)高會(huì)造成乳鐵蛋白結(jié)構(gòu)的變化，致使檢測(cè)結(jié)果偏離實(shí)際值。研究分別選取25、50、60、70、80、90 ℃進(jìn)行比較。準(zhǔn)確吸取1 mL 200 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液于EP管中，分別于25、50、60、70、80、90 ℃下恒溫水浴1 h，上機(jī)測(cè)定[5-6]。

1.2.3 肝素親和柱的選擇。肝素（Heparin）是一種含硫酸酯的酸性多糖，有文獻(xiàn)報(bào)道乳鐵蛋白可與這類多負(fù)電荷分子糖胺多糖結(jié)合。故在該文中采用HiTrapTM Heparin HP（1 mL）肝素親和柱作為目標(biāo)化合物純化和濃縮的前處理步驟。通過(guò)經(jīng)過(guò)和未經(jīng)過(guò)肝素親和柱純化的樣品比較圖，分析其對(duì)乳鐵蛋白檢測(cè)應(yīng)用的可行性[7]。

1.3 液相色譜條件

色譜柱：C4，5μm，300A（孔徑），250 mm×4.6 mm（內(nèi)徑）；檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：50 μL；流速：1.0 mL/min；流動(dòng)相：0.1%三氟乙酸溶液和乙腈，梯度洗脫參數(shù)如表1所示。

1.4 樣品前處理

1.4.1 提取。準(zhǔn)確稱取1 g試樣（試樣中含乳鐵蛋白0.1～10.0 mg）于50 mL燒杯中，加入5 mL溫?zé)岬牧姿釟涠c溶液（溫度不超過(guò)50 ℃），攪拌使樣品完全溶解，將樣品全部轉(zhuǎn)入50 mL具塞塑料離心管中，再向原燒杯中加入5 mL磷酸氫二鈉溶液，合并2次液體。漩渦振蕩器振蕩2 min，于室溫下3 000 r/min離心10 min。將上層脂肪層和下層沉淀層之間的液體小心轉(zhuǎn)移到另一個(gè)50 mL離心管中，再向原離心管中加入5 mL磷酸氫二鈉溶液重復(fù)操作1次，合并2次液體作為樣品提取液備用。

1.4.2 凈化。肝素親和層析柱先用5 mL磷酸氫二鈉溶液平衡，處理完畢后加入樣品提取液，待樣品液體完全流出后，再用10 mL磷酸氫二鈉溶液淋洗，棄去全部流出液。最后用3 mL磷酸氫二鈉-氯化鈉溶液洗脫，收集全部流出液，用磷酸氫二鈉-氯化鈉溶液定容至3 mL。將收集溶液過(guò)0.45 μm水相濾膜，供液相色譜-DAD檢測(cè)分析用。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取試劑的選擇

試驗(yàn)證明，在同樣的試驗(yàn)條件下用磷酸緩沖液作為提取試劑的回收率比水作為提取試劑高50%。另外，樣品中含有比較高濃度的蛋白類物質(zhì)時(shí)，乳鐵蛋白在磷酸鹽緩沖液中的溶解度優(yōu)于水中；后續(xù)試驗(yàn)采用肝素親和的活化需要磷酸鹽緩沖液；采用緩沖液作為提取試劑可以保證樣品上柱前的pH值在試驗(yàn)要求范圍。

2.2 提取溫度的選擇

試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，隨著溫度的上升，乳鐵蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化。從表2可知，目標(biāo)峰的峰高由25 ℃的76.9降低至90 ℃的22.2。因此得出結(jié)論，為了保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，在乳鐵蛋白提取過(guò)程中必須控制提取緩沖液的溫度在50 ℃以下。

2.3 肝素親和柱的選擇

從圖1可知，未經(jīng)過(guò)肝素親和柱純化的樣品成分比較復(fù)雜，給乳鐵蛋白的檢測(cè)造成了相當(dāng)大的難度，經(jīng)過(guò)肝素親和柱純化的樣品，雜質(zhì)就比較少，峰形比較好，符合檢測(cè)的要求。

2.4 線性關(guān)系及方法檢出限

用液相色譜法測(cè)定不同濃度的乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液，其測(cè)定結(jié)果表明乳鐵蛋白的標(biāo)準(zhǔn)溶液與峰面積響應(yīng)值之間存在著較好的線性關(guān)系，從表3、圖2可知，相關(guān)系數(shù)R2為0.999 1，回歸方程分別為y=2.540 7x-13.275。

根據(jù)限量檢測(cè)要求，對(duì)嬰幼兒配方奶粉、嬰幼兒配方米粉、成人配方奶粉等幾類樣品中乳鐵蛋白進(jìn)行了加標(biāo)回收重復(fù)試驗(yàn)。根據(jù)信噪比S/N=3，試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法檢出限均達(dá)到20 mg/100 g。

2.5 回收率的測(cè)定

應(yīng)用該方法，添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，對(duì)嬰幼兒配方奶粉、嬰幼兒配方米粉、成人配方奶粉3類樣品中進(jìn)行乳鐵蛋白回收率的測(cè)定，從表4可知，按已確定的樣品提取條件和色譜條件測(cè)定添加回收量，試驗(yàn)表明平均回收率達(dá)到75%～100%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

3 結(jié)論與討論

采用高效液相色譜法（HPLC）的方法測(cè)定乳制品中乳鐵蛋白含量的測(cè)定。試樣中的乳鐵蛋白經(jīng)磷酸鹽緩沖液提取，提取液經(jīng)HiTrapTM Heparin HP柱或相當(dāng)者凈化濃縮后，用反相高效液相色譜柱分離，于紫外檢測(cè)器280 nm處檢測(cè)，外標(biāo)法定量。該方法與文獻(xiàn)中報(bào)道的方法相比，具有操作方便簡(jiǎn)單、耗時(shí)較短、重復(fù)性好、回收率高、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)。

4 參考文獻(xiàn)

[1] LEVAY P F，VILJOEN M.Lactoferrin：a general review[J].Haemtologica，1995，80（3）：252-267.

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[5] 徐崢奎.乳鐵蛋白的開發(fā)現(xiàn)狀與前景[J].中國(guó)保健食品，2013（4）：16-17.

乳鐵蛋白范文第2篇

關(guān)鍵詞：酶聯(lián)免疫法；嬰幼兒配方奶粉；乳鐵蛋白；進(jìn)口奶粉；研究

中圖分類號(hào)：TB

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

doi：10.19311/ki.16723198.2016.31.090

母乳是嬰兒獲取營(yíng)養(yǎng)最好的方式，母乳中含有一定量的乳鐵蛋白可以確保嬰幼兒健康。但就現(xiàn)狀而言，母乳匱乏。因此奶粉喂養(yǎng)就成為主流，嬰幼兒奶粉的市場(chǎng)巨大。但由于國(guó)內(nèi)奶粉頻頻出現(xiàn)問(wèn)題，國(guó)人購(gòu)買進(jìn)口奶粉的欲望強(qiáng)烈。但進(jìn)口奶粉是否真的安全，還需要數(shù)據(jù)來(lái)證明。以母乳為標(biāo)準(zhǔn)，嬰幼兒奶粉的主要成為應(yīng)為乳鐵蛋白。調(diào)查顯示，很多進(jìn)口奶粉中的乳鐵蛋白含量較低，無(wú)法滿足嬰兒的營(yíng)養(yǎng)的需求。酶聯(lián)免疫法是檢測(cè)奶粉中營(yíng)養(yǎng)成分的主要方法，因此文章采用這一方法對(duì)一定數(shù)量的奶粉進(jìn)行了檢查，并公布了乳鐵蛋白含量。

1 乳鐵蛋白的特征以及酶聯(lián)免疫法

乳鐵蛋白是嬰幼兒哺乳中不可缺少的一種元素，主要成分為非血紅素和天然蛋白糖。人類第一次用固相和液相色譜法分離乳鐵蛋白是在1959年，乳鐵蛋白對(duì)嬰兒的免疫系統(tǒng)強(qiáng)化具體積極意義，同時(shí)能夠抗病毒和促進(jìn)嬰兒吸收。母乳中乳鐵蛋白的含量豐富，用于賴以生存的營(yíng)養(yǎng)元素。但是隨著母乳哺乳水平的降低，奶粉應(yīng)運(yùn)而生。檢驗(yàn)?zāi)谭壑腥殍F蛋白含量是十分重要的，一般要求，乳鐵蛋白的含量要在1-7ml以上才符合要求。隨著社會(huì)對(duì)于乳鐵蛋白的認(rèn)可，在奶粉中添加乳鐵蛋白已經(jīng)成為一種趨勢(shì)，食品中添加乳鐵蛋白也得到法律的支持。我國(guó)在法律上也將乳鐵蛋白定位為奶粉等食物中營(yíng)養(yǎng)的強(qiáng)化劑，并對(duì)含量做出基本要求。我國(guó)主要奶粉進(jìn)口國(guó)包括澳大利亞、新西蘭、荷蘭和瑞士等，這些國(guó)家的奶制品質(zhì)量較高，但由于對(duì)乳鐵蛋白的含量要求不同，因此對(duì)進(jìn)口乳鐵蛋白的檢測(cè)是必要的。目前，我國(guó)應(yīng)用較為廣泛的乳鐵蛋白檢測(cè)方法為免疫擴(kuò)散檢測(cè)法或者酶聯(lián)免疫法。我國(guó)對(duì)于國(guó)外奶粉的檢測(cè)較為嚴(yán)格，對(duì)由于缺乏對(duì)數(shù)量合理性的認(rèn)定，檢測(cè)結(jié)果還存在一定的疑問(wèn)。至2012年起，我國(guó)相關(guān)部門就開始對(duì)嬰幼兒奶粉質(zhì)量上提高可關(guān)注，通過(guò)定期試驗(yàn)的方法來(lái)檢測(cè)進(jìn)口嬰幼兒奶粉中的乳鐵蛋白含量，并形成報(bào)告，但唯一的缺陷是，雖然民眾對(duì)于乳鐵蛋白的作用以及進(jìn)口奶粉中乳鐵蛋白含量的要求尚不明確，因此我們以文獻(xiàn)的形式研究檢測(cè)結(jié)果。

2 酶聯(lián)免疫法使用的準(zhǔn)備階段

酶聯(lián)免疫法是目前嬰幼兒配方奶粉營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)的主要手段，具有較好的效果。檢測(cè)中所使用的樣品為16種市面上熱銷的嬰兒奶粉，本次檢測(cè)主要檢測(cè)奶粉中乳鐵蛋白的含量。產(chǎn)品來(lái)自美國(guó)、新西蘭等16個(gè)國(guó)家，其中奶粉的罐體上都有具體的含量標(biāo)識(shí)，范圍在5～100mg/100g之間，我們通過(guò)該方法檢測(cè)其真實(shí)性。所選的檢測(cè)儀器為全自動(dòng)酶儀包被有抗牛乳鐵蛋白（LT）的特異性多克隆抗體96孔微孔板，配合洗滌液和緩沖溶液，乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品和乳鐵蛋白-過(guò)氧化物酶結(jié)合物，另外還包括1mol/L磷酸終止液，目的就是檢驗(yàn)出進(jìn)口嬰幼兒配方奶粉中乳鐵蛋白的含量。將溶液稀釋后冷藏于2～8℃之間。稀釋溶液的配置選擇1ml濃縮洗液和4ml蒸餾水，同樣冷藏于2～8℃環(huán)境中。取適量實(shí)驗(yàn)所需的元素，包括氯化鈉、氯化鉀、磷酸鈉等。將其溶于蒸餾水中，并將其調(diào)整微堿性，最后配置成1L的該濃度溶液備用。將奶粉樣品稱好后放于準(zhǔn)備好的容器中，本次實(shí)驗(yàn)稱取質(zhì)量為1.00g的奶粉樣本，將其按照標(biāo)準(zhǔn)稀釋之后進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)后將乳蛋白的含量公布，尤其是對(duì)不符合規(guī)定的產(chǎn)品進(jìn)行懲罰。

3 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)方法的實(shí)施

在本次檢測(cè)中，我們采用平行檢測(cè)的方法，將各自100升的溶液加入到微孔中，在不接觸兩種樣品的同時(shí)添加100l酶的結(jié)合物，1h避光孵育后，進(jìn)行3次洗板，在每孔中加入底物100lTMB，室溫控制在（21℃±3℃，孵育時(shí)避光進(jìn)行10min，在每孔中加入終止液50l后，采取酶標(biāo)儀在450nm條件下讀取吸光值。取選取的6種進(jìn)口奶粉各1.0g作為樣品。使用PBS溶液300ml稀釋到要求濃度。本次檢驗(yàn)中的結(jié)果采用標(biāo)準(zhǔn)的曲線顯示，顯示結(jié)果中，有近三成進(jìn)口嬰幼兒配方奶粉的乳鐵蛋白的含量不達(dá)標(biāo)，提醒國(guó)民要注意選取。

4 酶聯(lián)免疫法檢測(cè)進(jìn)口嬰幼兒配方奶粉中乳鐵蛋白含量研究

本次研究我們采取標(biāo)準(zhǔn)曲線法對(duì)16種進(jìn)口奶粉中的乳鐵蛋白進(jìn)行研究和報(bào)告。采用方法為液相色譜法與電泳法相結(jié)合。并以4-參數(shù)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

在檢測(cè)過(guò)程中，我們?cè)诒敬螌?shí)驗(yàn)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)不同品牌的奶粉乳鐵蛋白含量具有較大的區(qū)別，即使在同一種產(chǎn)品中，同樣存在不同的乳鐵蛋白含量，因此國(guó)家要加大對(duì)進(jìn)口奶粉的監(jiān)管，要求奶粉罐體必須進(jìn)行產(chǎn)品的標(biāo)注才能上市銷售，并且含量的標(biāo)注必須要真實(shí)。一般稀釋倍數(shù)為400～600倍，將最終標(biāo)注在產(chǎn)品的曲線范圍內(nèi)，若不在范圍內(nèi)，將其再次調(diào)試后再進(jìn)行測(cè)試。本地實(shí)驗(yàn)所采取的方法使常用的方法，由于酶聯(lián)免疫法具有操作簡(jiǎn)單、敏感性高、測(cè)試效果好等特點(diǎn)，但是對(duì)于操作人員的技術(shù)能力具有較高的要求。另外，在嬰幼兒奶粉的測(cè)試過(guò)程中，由于測(cè)試影響因素較多，要正確測(cè)試奶粉中乳鐵蛋白的含量，還要正確配置濃度，采用相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，測(cè)試過(guò)程要及時(shí)記錄數(shù)據(jù)，對(duì)進(jìn)口奶粉做出最客觀的評(píng)價(jià)。其主要原理是借助了乳鐵蛋白在非酸性條件下受熱或?qū)е率Щ?，通^測(cè)試過(guò)程中乳鐵蛋白的變化。當(dāng)然，嬰幼兒對(duì)于乳鐵蛋白的需求會(huì)隨著年齡的增長(zhǎng)而減少，因此要進(jìn)口不同種類的奶粉產(chǎn)品，并且制定有關(guān)的規(guī)定。我國(guó)對(duì)嬰幼兒階段奶粉中營(yíng)養(yǎng)成分的含量規(guī)定為不得低于80%。這要求相關(guān)部門加強(qiáng)對(duì)進(jìn)口奶粉的管理，尤其是對(duì)其中主要成分乳鐵蛋白含量的測(cè)試，營(yíng)養(yǎng)成分符合才能進(jìn)口。乳鐵蛋白是嬰幼兒奶粉中必備的元素，由于民眾信任這一點(diǎn)，因此近年來(lái)成為主要的賣點(diǎn)。一般進(jìn)口奶粉將含有乳鐵蛋白的嬰幼兒奶粉視為高級(jí)產(chǎn)品，價(jià)格較高。但在這一過(guò)程中，很多產(chǎn)品借助這一特征打虛假?gòu)V告。購(gòu)買此類產(chǎn)品不僅浪費(fèi)錢財(cái)，而且對(duì)嬰兒的健康造成影響，對(duì)現(xiàn)代人而言，要正確認(rèn)識(shí)嬰幼兒奶粉的營(yíng)養(yǎng)成分，對(duì)相關(guān)部門而言，要進(jìn)一步的進(jìn)行檢測(cè)。

5 總結(jié)

乳鐵蛋白是奶粉中的主要成分，是奶粉的強(qiáng)化劑之一。在購(gòu)買過(guò)程中，很容易按照乳鐵蛋白來(lái)判斷產(chǎn)品的優(yōu)劣。但在這一過(guò)程中，很多顧客并不能清楚的認(rèn)識(shí)這一點(diǎn)，盲目的購(gòu)買國(guó)外產(chǎn)品。不僅造成經(jīng)濟(jì)損失，所購(gòu)買的產(chǎn)品質(zhì)量較低。因此，筆者通過(guò)具體的實(shí)驗(yàn)方式來(lái)檢驗(yàn)嬰幼兒配方奶粉中乳鐵蛋白的含量，使民眾能夠了解奶粉中乳鐵蛋白的真正含量，從而正確選擇奶粉，確保嬰兒的應(yīng)用安全。正確測(cè)試乳鐵蛋白并將之公之于眾是保證我國(guó)公民權(quán)利和安全的主要手段。因此我們對(duì)16種在銷的并且是購(gòu)買量較大的進(jìn)口嬰兒奶粉進(jìn)行了檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示，部分進(jìn)口奶粉中的乳鐵蛋白含量并不在規(guī)定范圍之內(nèi)，我國(guó)目前對(duì)于進(jìn)口奶粉的檢測(cè)相對(duì)嚴(yán)格，但國(guó)際上對(duì)乳鐵蛋白含量的要求與我國(guó)要求有一定的差別，這就要求我國(guó)進(jìn)一步明確食品中，嬰幼兒奶粉中乳鐵蛋白的含量要求，并且增加科研力量，對(duì)中國(guó)嬰兒營(yíng)養(yǎng)成分需求進(jìn)行試驗(yàn)和剖析，并將其公布，要求進(jìn)口奶粉必須標(biāo)注乳鐵蛋白含量，滿足國(guó)人需求。

參考文獻(xiàn)

[1]聶炎炎，劉冬虹，吳環(huán)等.嬰幼兒配方奶粉中生物素含量的快速微生物檢測(cè)方法研究[J].檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2014，（06）.

乳鐵蛋白范文第3篇

關(guān)鍵詞：肝癌；介入治療；血清鐵蛋白；預(yù)后

The Relationship Hepatic Carcinoma Double Interventional Treatment Serum Ferritin Levels and Prognosis

YUAN Ke-hua， ZHENG Jian-ping， ZHANG Pei-xian， DENG Lei， LONG Yi

（Kunming City Yan'an Hospital， Department of Oncology， Kunming Yunnan 650051， China）

Abstract：Objective：to analyze the joint TACE and RFA liver cancer after treatment with conventional serum ferritin level and prognosis，the relationship between. Methods：40 patients with terminal-stage liver cancer，not randomly divided into two groups，group A conventional TACE+RAF therapy，group B，intravenous chemotherapy or best palliative care，including male 16 group A，B group of four people，women，A group of 12 people，B group of eight people，median age group A 63-year-old，group B at the age of 61.Respectively，before treatment，1 month，3 months after treatment to determine serum ferritin，comparing the two groups. Results：A/B group of serum ferritin levels significantly decreased after treatment，but 1 month，3 months after treatment group A drop is more obvious. Conclusion：the serum ferritin level changes have correlation with the progress of the liver cancer or improved，after treatment serum ferritin declined more，the better the prognosis.

原發(fā)性肝癌是指肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管細(xì)胞發(fā)生的惡性腫瘤，是世界上最常見的惡性腫瘤之一，以亞洲和非洲多見。目前，手術(shù)仍是治療早期肝癌的首選方法。但由于肝癌本身的病理特點(diǎn)，絕大部分患者僅能采用非手術(shù)治療。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究通過(guò)選取中晚期肝癌患者40例，非隨機(jī)分為兩組，A組采用TACE+RAF治療，B組采用靜脈化療或最佳姑息治療，其中男性A組16，B組4例，女性A組12例，B組8例，中位年齡A組63歲，B組61歲。分別在治療前，治療后1月、3月測(cè)定血清鐵蛋白，兩組比較，以分析治療后血清鐵蛋白的水平與預(yù)后的關(guān)系。

1.2方法 A組TACE化療藥物為：5-氟尿嘧啶（750～1000mg）、順鉑（50～100mg）、多柔比星（20～40mg）3種藥物同時(shí)給藥或交替使用。幾種藥物的聯(lián)合應(yīng)用考慮到藥物作用于腫瘤細(xì)胞的不同周期，藥物劑量要視藥物毒性反應(yīng)而定，患者個(gè)體反應(yīng)差異較大。碘油為油劑，抗癌藥多為水溶性，混合時(shí)將兩者同時(shí)盛入小杯內(nèi)，用注射針筒反復(fù)抽吸和注出可使其乳化，制成乳劑，再經(jīng)導(dǎo)管注入。超聲監(jiān)測(cè)微氣泡形成，也可作為確認(rèn)消融過(guò)程的另一種手段。對(duì)較大的腫瘤需重疊布針消融，方法是依次將電極針插入到腫瘤中心以外的各處，然后進(jìn)行消融。B組化療方案為5-氟尿嘧啶（1000mg/m2）、順鉑（50～100mg/m2）、多柔比星（20～40mg/m2）。

1.3標(biāo)本的準(zhǔn)備 空腹抽取靜脈血3ml，3000r/min離心10min，分離血清。

1.4測(cè)定方法 電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法，儀器：CHEMCLIN600全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，北京科美生物公司提供，并配用其試劑盒，參考范圍：男16～220（ng/ml），女10～124（ng/ml），血清鐵蛋白以≥172（ng/ml）為判斷異常臨界值。操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

A/B組治療后血清鐵蛋白水平明顯下降，但A組治療后1月、3月的下降更明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)P值=0.06，看似無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但其值接近

3討論

原發(fā)性肝癌的血供大部分來(lái)自肝動(dòng)脈，少量由門靜脈供血。故肝動(dòng)脈栓塞后可以阻斷或減少腫瘤的主要血供使腫瘤發(fā)生壞死、縮小以至消失，正常肝組織不會(huì)受到嚴(yán)重影響[1]。肝動(dòng)脈灌注化療、栓塞治療肝癌，肝臟局部藥物濃度是全身濃度的100～400倍，而瘤區(qū)藥物濃度高于正常肝組織5～20倍，對(duì)藥物發(fā)揮抗癌作用極為有利，再加上大劑量灌注化療藥物集中于靶部位而提高抗癌療效，并可降低化療藥物的體循環(huán)濃度，減少全身化療毒性。手術(shù)或TACE聯(lián)合應(yīng)用，可以進(jìn)一步提高療效。RFA的消融緣通常只有0.5～lcm而殘留癌組織，最近的cooled-wet技術(shù)可能提高RFA的效果。TACE聯(lián)合RFA治療惡性腫瘤將有利于發(fā)揮各自的優(yōu)點(diǎn)，增加治療效果：①在對(duì)腫瘤加熱時(shí)，瘤內(nèi)及瘤周的血液循環(huán)可起到冷卻作用，TACE可以減少腫瘤組織的血供，增加腫瘤熱消融的壞死體積[2]； ②熱效應(yīng)可以增加腫瘤組織對(duì)化療藥物的攝取和腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性；③RFA可增強(qiáng)機(jī)體局部和全身的細(xì)胞免疫功能，預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)；④TACE可對(duì)腫瘤內(nèi)潛在的病灶起到治療作用。

4 結(jié)論

鐵蛋白是一種分子量較大的含鐵蛋白，由24個(gè)非共價(jià)鍵連接成亞單位，分子量大約為460000，為機(jī)體內(nèi)一種貯存鐵的可溶性組織蛋白，它由一個(gè)蛋白質(zhì)外殼和一個(gè)鐵核心構(gòu)成。血清鐵蛋白是檢查體內(nèi)鐵缺乏的最靈敏的指標(biāo)。鐵蛋白也是惡性腫瘤的標(biāo)志物之一。肝癌患者的SF水平均較正常人高，提示腫瘤患者機(jī)體普遍存在著鐵超載。證據(jù)表明，許多致癌理化因子可直接或間接干擾動(dòng)物和人體鐵代謝，使鐵排出減少，積蓄增加。有20～30%甲胎蛋白陰性的肝癌，目前沒(méi)有很好的腫瘤標(biāo)志物參考，血清鐵蛋白也許是比較敏感的指標(biāo)之一。

參考文獻(xiàn)：

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乳鐵蛋白范文第4篇

1　鐵蛋白的分布

鐵蛋白可溶于水、胞漿和血漿，在細(xì)胞內(nèi)液和外液中均較穩(wěn)定。鐵蛋白在脾臟、肝臟、骨髓中含量最高，在其他組織、血清、血細(xì)胞中含量相對(duì)較少，雙殼類動(dòng)物(如合浦珠母貝)的外套膜、消化腺和肌肉中的含量比較高。細(xì)胞內(nèi)的鐵蛋白主要是存在于細(xì)胞質(zhì)中，脊椎動(dòng)物的線粒體和細(xì)胞核也含有少量鐵蛋白。昆蟲還能向外分泌鐵蛋白。

2　鐵蛋白的結(jié)構(gòu)

不同來(lái)源(如人、馬、牛蛙和細(xì)菌等)的鐵蛋白在一級(jí)結(jié)構(gòu)上差異很大(氨基酸序列相似性有時(shí)只達(dá)到14％)，但都有相同的結(jié)構(gòu)體系，都是由24個(gè)亞基以高度對(duì)稱性方式組成的內(nèi)空腔的蛋白殼，空心直徑約為8 nm，外徑12-13 nm，分子量為500 kDa，空腔中可積累多達(dá)4 500個(gè)鐵原子。

不同生物鐵蛋白的24個(gè)亞基相差也較大，在脊椎動(dòng)物中，這24個(gè)亞基分為兩種：H亞基(氧化酶活性位點(diǎn))和L亞基(氧化酶非活性位點(diǎn))。H亞基含有一個(gè)氧化Fe2+的氧化中心，L亞基負(fù)責(zé)鐵蛋白“空腔”的形成，它們?cè)谫A存鐵和調(diào)節(jié)鐵分布中起重要作用。在哺乳動(dòng)物中，不同鐵蛋白(H24L0、H22L2、HOL24)的H亞基和L亞基的比例不同，鐵蛋白對(duì)金屬的親和力依賴于蛋白殼中這兩個(gè)亞基的組成比例，這個(gè)比例在不同發(fā)育時(shí)期、不同組織、不同細(xì)胞是不同的，這就滿足了各種細(xì)胞對(duì)鐵的不同的需求。在牛蛙、鮭魚、伯氏肩孔南極魚和紐氏肩孔南極魚等魚的鐵蛋白中還有第三種亞基――M亞基，牛蛙中重組M-鐵蛋白比重組H－鐵蛋白有更高的亞鐵氧化酶活性，在伯氏肩孔南極魚和紐氏肩孔南極魚中只有H和M亞基，且亞基的組成具有組織特異性，脾臟中為M-均聚物，肝臟中為H／M雜聚物。昆蟲分泌的鐵蛋白的24個(gè)亞基共有4種，分子量分別為24 kDa、26 kDa、28 kDa、30 kDa。24kDa和26kDa亞基有相同的基因編碼并且具有亞鐵氧化酶活性，28 kDa亞基沒(méi)有亞鐵氧化酶活性位點(diǎn)且由不同的基因編碼，30kDa亞基的序列還不清楚。

3　鐵蛋白的功能

3.1　儲(chǔ)存鐵離子

鐵蛋白可儲(chǔ)存細(xì)胞中多余的鐵，當(dāng)外源可利用的鐵不足時(shí)，鐵蛋白可釋放鐵被細(xì)胞利用。鐵蛋白儲(chǔ)存鐵分為4個(gè)步驟：Fe2+的進(jìn)入及氧化、Fe3+的遷移、鐵核形成以及鐵核的增大，鐵的氧化發(fā)生在蛋白殼中，將Fe2+綁定在亞鐵氧化酶中心，F(xiàn)e2+和氧反應(yīng)生成了Fe3+，F(xiàn)e3+移向空腔表面，繼而成核，礦化形成鐵核。當(dāng)細(xì)胞缺鐵時(shí)，鐵蛋白中的Fe3+被還原為Fe2+，F(xiàn)e2+與運(yùn)鐵蛋白結(jié)合，被氧化為Fe3+再運(yùn)至需要代謝的場(chǎng)所，其過(guò)程可用圖1表示。

過(guò)量鐵有“毒”的原因是：過(guò)量的二價(jià)鐵與過(guò)氧化氫反應(yīng)產(chǎn)生活性自由基(Fe3++H2O2Fe3+OH-+HO)，引起蛋白質(zhì)、脂肪、DNA的氧化，從而引起細(xì)胞損傷甚至死亡。而鐵蛋白可以在有氧條件下與二價(jià)鐵離子反應(yīng)，將鐵離子螯合在內(nèi)部的空心結(jié)構(gòu)中，抑制了鐵的氧化反應(yīng)，減少自由基的產(chǎn)生，從而保護(hù)細(xì)胞不受鐵過(guò)量引起的氧化損害。鐵過(guò)量導(dǎo)致了肝臟的損害，主要是因?yàn)檫^(guò)量鐵增加了細(xì)胞膜脂肪的氧化，而由此引起的保護(hù)效應(yīng)，即是細(xì)胞增加了鐵蛋白的合成，并以無(wú)毒的形式來(lái)沉積大量的鐵。

3.3　其他作用

鐵蛋白不僅是主要的鐵調(diào)節(jié)蛋白，而且在其他方面也有重要作用，可作為應(yīng)激反應(yīng)時(shí)的反應(yīng)蛋白，對(duì)粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)程起到調(diào)節(jié)作用，對(duì)骨髓起源細(xì)胞有抑制作用，具有抑制造血系統(tǒng)細(xì)胞增生和淋巴細(xì)胞增殖的作用。

4　鐵蛋白合成的調(diào)控

4.1　翻譯水平的調(diào)節(jié)

鐵調(diào)控蛋白(IRP)和鐵反應(yīng)元件(IRE)相互作用的鐵依賴性調(diào)節(jié)體制是調(diào)節(jié)鐵蛋白表達(dá)的典型體系。鐵反應(yīng)元件是位于鐵蛋白5’非翻譯區(qū)的一個(gè)特定序列，它與鐵調(diào)節(jié)蛋白有很高的親和力，IRE／IRP復(fù)合物的形成阻止了核糖體的組裝和翻譯，IRE與IRP的結(jié)合受細(xì)胞中游離鐵濃度的調(diào)節(jié)，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鐵離子濃度較低時(shí)，IRP／IRE阻止了核糖體組裝，從而抑制了鐵蛋白的翻譯；當(dāng)鐵離子濃度升高時(shí)，IRP／IRE減少，從而增強(qiáng)了鐵蛋白的翻譯，IRE／IRP體系同時(shí)調(diào)節(jié)H-亞基和L-亞基。

4.2　轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)

鐵調(diào)節(jié)鐵蛋白的生物合成主要是在翻譯水平，但是也會(huì)在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)鐵蛋白的表達(dá)。如給雄性大鼠喂食含過(guò)量鐵的飼料，其肝臟中的鐵蛋白H-亞基mRNA及其單體蛋白分別是正常組的8倍和2倍；在大鼠的腹腔中注射0.5 mL檸檬酸鐵銨溶液(10 mg／mL)后，肝臟中的L-鏈mRNA增加了2倍；對(duì)羅氏沼蝦進(jìn)行肌肉注射FeCl3溶液，3 h后，肌肉中鐵蛋白mRNA增加了61倍，卵巢中鐵蛋白mRNA增加近4倍，24h后，心臟鐵蛋白mRNA增加了8倍，且48 h內(nèi)一直維持在較高水平。以上這些實(shí)例都說(shuō)明了鐵也會(huì)在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)節(jié)鐵蛋白的表達(dá)，但具體調(diào)控機(jī)制仍在進(jìn)一步的研究中。

4.3　其他因素對(duì)鐵蛋白基因表達(dá)的調(diào)控

除了鐵離子對(duì)鐵蛋白的合成有調(diào)節(jié)作用之外，還有許多因素調(diào)節(jié)著鐵蛋白的合成，如氧化應(yīng)激、其他的金屬離子、細(xì)胞因子、NO等都影響鐵蛋白基因的表達(dá)。氧化應(yīng)激可直接調(diào)節(jié)鐵蛋白基因表達(dá)；Zn2+、Cd2+能調(diào)節(jié)鐵蛋白mRNA的合成；白細(xì)胞介素IL-1(急性反應(yīng)因子)會(huì)優(yōu)先調(diào)節(jié)H-亞基的合成，提高了H：L亞基的比例；NO通過(guò)作用于胞漿中的IRP，調(diào)節(jié)IRP與IRE的親和性實(shí)現(xiàn)鐵蛋白合成的調(diào)節(jié)，當(dāng)NO合成增加時(shí)，活化IRP，使之與IRE結(jié)合，降低鐵蛋白的合成，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鐵濃度上升；氧化亞氮(NO+)會(huì)引起IRP2的降解，從而導(dǎo)致鐵蛋白合成增加。

乳鐵蛋白范文第5篇

[關(guān)鍵詞] 鑒別；良惡性；胸腔積液

中圖分類號(hào)：R446 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-5200（2017）01-098-02

DOI：10.11876/mimt201701039

胸腔積液是因血液循環(huán)障礙引起胸腔內(nèi)液體積聚[1]。胸腔積液通過(guò)超聲波檢查、胸腔穿刺、X線檢查結(jié)合常規(guī)叩診等可明確診斷[2]。結(jié)核性及非結(jié)核性良性胸腔積液一般預(yù)后良好[3]。惡性腫瘤引起的惡性胸腔積液治療難度較大，預(yù)后較差[4-5]。本研究探討膽固醇、C-反應(yīng)蛋白、鐵蛋白、癌胚抗原、β2微球蛋白、乳酸脫氫酶、腺苷脫氨酶等指標(biāo)在良惡性胸腔積液快速鑒別診斷中的價(jià)值。

1 資料和方法

1.1 一般資料

166例于我院就診明確診斷的胸腔積液患者病程1個(gè)月～3年，其中結(jié)核性胸腔積液46例、非結(jié)核性良性胸腔積液80例、惡性胸腔積液40例，三組患者性別、年齡、病程等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)儀器、試劑 生化檢測(cè)的儀器為北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司生產(chǎn)的M401542全自動(dòng)生化分析儀及其配套試劑，安徽赫爾生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科技有限公司提供的相關(guān)試劑。

1.2.2 檢測(cè)方法 使用一次性胸腔積液采集裝置抽取患者10mL胸腔積液，分離上清液。癌胚抗原采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)；乳酸脫氫酶、腺苷脫氨酶采用酶聯(lián)吸附法檢測(cè)；β2微球蛋白、C-反應(yīng)蛋白運(yùn)用免疫投射比濁法檢測(cè)；結(jié)核抗體運(yùn)用斑點(diǎn)免疫膠體金滲濾法進(jìn)行檢測(cè)；鐵蛋白、膽固醇采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件spss13.00處理數(shù)據(jù)，x±s表示計(jì)量資料，用t檢驗(yàn)，以（P

2 結(jié)果

檢測(cè)結(jié)果顯示，惡性胸腔積液患者的膽固醇、鐵蛋白、癌胚抗原、乳酸脫氫酶水平明顯高于結(jié)核性、非結(jié)核性良性胸腔積液患者；結(jié)核性胸腔積液患者的腺苷脫氨酶水平明顯高于其他良性、惡性胸腔積液患者；良性胸腔積液患者的C-反應(yīng)蛋白、β2微球蛋白水平明顯高于結(jié)核性、惡性胸腔積液患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P

3 討論

胸腔積液是心臟疾病、全身性疾病慢性發(fā)展過(guò)程中常見并發(fā)癥[6]，尋找特異性高的檢測(cè)指標(biāo)對(duì)該病的診治具有重要作用。

正常人體內(nèi)的鐵蛋白含量在30～130μg/L，主要分布在肝臟、脾臟[7-8]。機(jī)體長(zhǎng)期處于貧血狀態(tài)或有臟器損傷時(shí)，會(huì)加速鐵蛋白的合成速度，使鐵蛋白水平明顯升高。惡性腫瘤可導(dǎo)致鐵蛋白明顯升高[9]。癌胚抗原水平越高，說(shuō)明惡性腫瘤發(fā)展程度越嚴(yán)重，預(yù)后越差[10-11]。所以，本組惡性胸腔積液患者的癌胚抗原水平（52.7±29.9）μg/L明顯高于其他類型胸腔積液，癌胚抗原水平可以作為良惡性胸腔積液的鑒別指標(biāo)。腺苷脫氨酶是一種巰基酶，廣泛分布在機(jī)體內(nèi)各組織，是細(xì)胞免疫活性的重要組成部分[12-13]。其對(duì)肝臟疾病、胸腔積液、腫瘤、血液疾病具有重要的診斷價(jià)值。國(guó)外學(xué)者的一項(xiàng)薈萃分析顯示腺苷脫氨酶是診斷結(jié)核性胸膜炎的良好指標(biāo)[14]。本研究中結(jié)核性胸腔積液組的腺苷脫氨酶水平同樣明顯高于其他兩組。膽固醇水平在炎性因子刺激下會(huì)明顯增高，特別是低密度膽固醇活性明顯升高[15]，因此惡性胸腔積液患者的膽固醇水平明顯升高。C-反應(yīng)蛋白是機(jī)體出現(xiàn)炎性反應(yīng)的特異性標(biāo)志。非結(jié)核性良性胸腔積液患者主要緣于急性感染，所以炎性指標(biāo)C-反應(yīng)蛋白活躍[16]。β2微球蛋白主要由淋巴細(xì)胞生成，機(jī)體發(fā)生感染時(shí)激活了免疫反應(yīng)，加速β2微球蛋白的分泌，使其水平明顯升高，因此本研究中結(jié)核性、非結(jié)核性良性胸腔積液患者的β2微球蛋白水平明顯高于惡性胸腔積液患者。乳酸脫氫酶是一種氧化還原酶，分子質(zhì)量較大，主要分布在骨骼肌、心臟、肝腎等組織[17]，有報(bào)道其對(duì)漏出液和滲出液的鑒別具有一定價(jià)值[18]。本研究中結(jié)核性胸腔積液組、惡性胸腔積液組乳酸脫氫酶均明顯升高。上述各指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可能提高鑒別的靈敏度。

參 考 文 獻(xiàn)

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