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情感故事片范文第1篇

[關(guān)鍵詞] 骨髓間充質(zhì)干細胞 視網(wǎng)膜細胞 大鼠

成體干細胞中的骨髓間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells, MSCs）具有多向分化的潛能，雖然其來源于中胚層，卻可以跨胚層分化為外胚層來源的組織細胞，而視網(wǎng)膜則來源于胚胎期神經(jīng)外胚層。MSC表達許多生長因子和細胞因子受體以及細胞與細胞黏附作用的受體，提示MSC的功能受自分泌和旁分泌循環(huán)的調(diào)控。這成為不同方法誘導MSCs定向分化的理論基礎(chǔ)。組織或細胞在受到損傷后會進行自身修復，視網(wǎng)膜是接受光能，形成視覺的重要組織結(jié)構(gòu)，如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受力，將會造成視網(wǎng)膜光損傷。本研究旨在用光損傷視網(wǎng)膜片的培養(yǎng)上清液體外誘導MSCs，看其損傷時分泌的細胞因子和分化所需蛋白是否能誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜光感受器樣細胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞。探索體外構(gòu)建MSCs分化成視網(wǎng)膜細胞所需微環(huán)境的理論可能性。

1材料與方法

1.1 實驗動物

健康無眼病成年Sprague-Dawley(SD)大鼠，雌雄不限，體重120~150g（吳氏實驗動物中心）。

1.2 大鼠視網(wǎng)膜片的取材

10%水合氯醛按0.3mL/100g腹腔注射麻醉，無菌狀態(tài)下取出眼球。把眼球用10%FBS的LG-DMEM洗滌3次，去除球周筋膜組織，清洗干凈后移入另一盛有10% FBS的LG-DMEM培養(yǎng)皿中，在解剖顯微鏡下，在角鞏膜緣后1mm處剪開，用顯微剪取出角膜、晶狀體、玻璃體，留有外層覆蓋鞏膜的視網(wǎng)膜杯。把視網(wǎng)膜杯浸入培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)液里，由杯緣向杯底，用顯微鑷鈍性分離視網(wǎng)膜和鞏膜，在視神經(jīng)處剪斷，徹底分離視網(wǎng)膜色素上皮層與視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層。

1.3 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層常規(guī)石蠟切片HE染色

將大鼠視網(wǎng)膜片（只包含神經(jīng)上皮層）常溫浸泡甲醛24h以固定，常規(guī)脫水、透明、包埋、切片，常規(guī)脫蠟，行蘇木素-伊紅(HE)染色，封片。用數(shù)字攝像系統(tǒng)觀察并采集照片。

1.4 視網(wǎng)膜片光損傷和條件培養(yǎng)液的制備

把分離好的4只眼球的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層移入另一盛有8mlNeurobasal+B27的小培養(yǎng)皿中（直徑60mm）。用眼科顯微剪把視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層剪成1mm×1mm×1mm大小。在超凈臺內(nèi)，50W,12V的鹵素燈作為光源，采取直落式照射上述的小培養(yǎng)皿，用TES-1330A照度計測定光照強度，調(diào)整光源與培養(yǎng)皿之間的距離（3.5cm），使被照細胞同一水平的光照強度為(1950 ±200) Lux ,光照時該水平溫度變化在0.5℃之內(nèi)，持續(xù)光照45min，光照后將培養(yǎng)皿放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)1小時15min。用去針頭的針筒吸出小培養(yǎng)皿中的液體，離心后上清液用0.22um濾器過濾，以2:3的比例與10%FBS-LGDMEM混合，并吹打均勻，制成條件培養(yǎng)液Ⅰ。條件培養(yǎng)液Ⅱ制備方法同條件培養(yǎng)液Ⅰ，只是視網(wǎng)膜片未經(jīng)過光損傷處理，盛有Neurobasal+B27和視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層的小培養(yǎng)皿直接放入37℃、5%CO2飽和濕度培養(yǎng)箱培養(yǎng)2小時。條件培養(yǎng)液Ⅲ為Neurobasal+B27和10%FBS-LGDMEM以2：3的比例混合，無視網(wǎng)膜片以及光損傷處理。三種條件培養(yǎng)液均放于-20℃保存。

1.5 視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層光損傷后電鏡觀察

取材，3%戊二醛―1.5%多聚甲醛前固定，1%鋨酸―1.5%亞鐵氰化鉀后固定，酒精―丙酮脫水，環(huán)氧樹脂618包埋劑包埋；超薄切片，醋酸鈾、檸檬酸鉛染色，日立Hu-12A型（飛利浦208型）透射電鏡觀察、攝影。

1.6 大鼠MSC的分離和培養(yǎng)

取SD大鼠，麻醉后，無菌條件下取出雙側(cè)股骨和脛骨，剔除周圍肌肉組織。在超凈臺內(nèi)，用PBS沖干凈，轉(zhuǎn)移到盛有20%FBS-LGDMEM的培養(yǎng)皿中，去除長骨2端骨骺，暴露骨髓腔。用培養(yǎng)液沖出骨髓腔內(nèi)的骨髓液，吹打。用200目篩網(wǎng)過濾后置于離心管中，1000rpm,10min，棄上清，用10%FBS-LGDMEM培養(yǎng)液重懸后以10×108/mL接種于塑料培養(yǎng)瓶中。37℃、5%二氧化碳培養(yǎng)，24h換液，以后每3d換液一次，除去非貼壁細胞，12~15d后MSC達90%瓶底面積時傳代，P1后細胞融合至80%進行1：2傳代。

1.7 MSC的鑒定

當?shù)?代的BMSCs融合達90%,經(jīng)0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化、離心后用PBS制成2×106/mL的細胞懸液，將細胞懸液分裝至4只樣品管中，分別加入熒光標記的小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD90-PE，小鼠抗大鼠單抗CD34-FITC+小鼠抗大鼠單抗CD44-PE及其對應的同型對照各10μL，混勻，37℃下避光反應20min。每管加入1mLPBS混勻，離心2000rpm，10min以洗去未標記上的抗體。棄上清液，每管再加入1mLPBS重新混懸細胞,用流式細胞儀檢測細胞表面抗原CD34、CD44和CD90的表達。對細胞純度進行鑒定。

1.8 MSC體外誘導成視網(wǎng)膜細胞

取第3代BMSCs細胞消化、離心后用10%FBS-LGDMEM重懸后以200ul/孔接種于6孔板，24h待BMSC貼壁后，棄培養(yǎng)液，將細胞分為3組：第1組換用條件培養(yǎng)液Ⅰ，第2組換用條件培養(yǎng)液Ⅱ，第三組換用條件培養(yǎng)液Ⅲ，3個組均在在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱孵育。每天觀察記錄細胞生長分化情況，每2天換一次條件培養(yǎng)液，培養(yǎng)至第7~8天時停止。

1.9 誘導的BMSCs細胞免疫化學染色

采用Envision二步法，分別將3組誘導的MSC玻片取出，均與神經(jīng)元特異性標志小鼠抗大鼠醇化酶(NSE) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）、星形膠質(zhì)細胞特異性標志小鼠抗大鼠單克隆抗體神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）、光感受器特異性標志小鼠抗大鼠單克隆抗體視紫質(zhì)(Rhodopsin) （稀釋度1：50）（美國Fisher Scientific公司）和二抗（生物素標記的羊抗鼠IgG抗體）作用，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidin,DAB）顯色后，蘇木素復染，室溫干燥后封片，光鏡下觀察是否表達視紫紅質(zhì)、NSE、GFAP。選取至少10個隨機視野，每個視野在200倍物鏡下統(tǒng)計陽性細胞數(shù)和整個視野細胞總數(shù)，計算陽性細胞率，測量值均以x±s表示，來對三種誘導條件下所表達的陽性細胞進行分析。

1.10 數(shù)據(jù)分析方法

所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，并進行雙因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 大鼠視網(wǎng)膜片光損傷電鏡觀察所見:光損傷后視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層，可見光感受器外段腫脹成圓形，盤膜結(jié)構(gòu)紊亂，疊狀結(jié)構(gòu)解離，膜間隙增大。內(nèi)節(jié)線粒體固縮和腫脹，空泡變性。染色質(zhì)濃染，核膜皺縮內(nèi)陷。

2.2 大鼠MSC細胞的鑒定(如圖1)

圖1 大鼠MSC細胞的鑒定

BMSCs流式細胞術(shù)鑒定結(jié)果，培養(yǎng)的第三代BMSCs干細胞表面標志CD90陽性（CD90+/CD34-：92%），基質(zhì)細胞表面標志CD44陽性（CD44+/CD34-：93%）

2.3 誘導分化的細胞形態(tài)學觀察（如圖2）

A：3天后原來梭形的BMSCs胞體發(fā)生收縮，呈圓形或橢圓形，細胞邊緣變得不規(guī)整，有零星的細胞突起×300；B：4天后BMSCs有較多突起×300；

C、D：7天后，細胞發(fā)生遷移并相互之間建立突觸聯(lián)系×200；E：對照組BMSs分化細胞明顯減少，也少有建立突觸聯(lián)系的細胞×300。

圖2 誘導分化的BMSCs形態(tài)學觀察

2.4 誘導分化的視網(wǎng)膜樣細胞不同誘導條件下免疫細胞化

學染色表達指標陽性率

表1 不同誘導條件下免疫細胞化學染色表達指標陽性率

注：均方比F值為7.6054，F(xiàn)0.05=6.944，可見視網(wǎng)膜片三組間兩兩比較差異有顯著性（P ＜0.05）。

3 討論

3.1視網(wǎng)膜光損傷

視網(wǎng)膜是接受光能，形成視覺的重要組織結(jié)構(gòu)，但也是眼組織中最易受到光損傷的部位。如果光照強度或光照時間超過了視網(wǎng)膜的承受能力，將會造成視網(wǎng)膜光損傷。

本實驗采用（50W,12V的鹵素燈作為光源，采取直落式照射上述的小培養(yǎng)皿，1950 ±200Lux）主要是考慮到以下幾點：①視網(wǎng)膜光損傷受諸多因素影響，內(nèi)在因素包括視網(wǎng)膜部位、體溫、膚色、年齡、種屬、營養(yǎng)狀態(tài)及晶體狀況，外在因素包括視網(wǎng)膜暗適應狀態(tài)、光照射方式、光強度、波長和光照時間。因此本實驗選擇單純照射細胞而不是照射活體動物來盡量排除內(nèi)在因素的干擾，選擇成年SD白鼠是考慮到有研究表明白種人較黑種人容易損傷，大白鼠視網(wǎng)膜對光的敏感性隨著年齡的增加而增高。②視網(wǎng)膜光化學損傷的敏感性隨著光波長的縮短而呈對數(shù)上升，因此短波長更易引起視網(wǎng)膜光損傷，角膜可吸收

3.2 MSC細胞分離、培養(yǎng)、鑒定

用組織工程技術(shù)體外分離和培養(yǎng)所需靶細胞，用于體內(nèi)相關(guān)疾病的細胞替代治療為多種疾病帶來了新的治療思路。因此有關(guān)此類的研究受到廣泛關(guān)注。胚胎干細胞具有發(fā)育全能性，但涉及倫理學問題，以往受到很大限制，發(fā)展緩慢。應用眼色素上皮緣的視網(wǎng)膜干細胞[3]及鼠腦神經(jīng)先祖細胞移植[4]也由于供體組織有限性及安全性問題，不利于治療視網(wǎng)膜疾病的開展。于是有人把目光投向成體干細胞中的MSCs，因其來源于中胚層，可以跨系統(tǒng)甚至跨胚層分化為3個胚層來源的細胞，特別是中胚層和神經(jīng)外胚層來源組織的細胞（視網(wǎng)膜來源于胚胎期神經(jīng)外胚層），并且經(jīng)過20~30次細胞分裂后，這種分化特性也不會消失[5]。且分離培養(yǎng)方便。MSC存在于體內(nèi)多處如胎血、胎肝、胎脾、胎兒的骨髓以及成人骨髓[6], 臍血、脂肪組織和成人的外周血中亦含有數(shù)量極少的間質(zhì)干細胞[7]，現(xiàn)多從骨髓中分離獲得。MSC的純化方法有貼壁篩選法，流式細胞儀分選法，密度梯度離心法，免疫磁珠法。較常采用的方法為貼壁篩選法和密度梯度離心法，或兩者聯(lián)合。MSCs的表面標志具有非單一性，表達了間質(zhì)細胞、內(nèi)皮細胞和表皮細胞的表面標志，一般認為CD29、CD44、CD71、CD90、CD105、CD120a、CD124、CD166以及STRO-1、SH2、SH3是其重要的標志物，流式細胞術(shù)發(fā)現(xiàn)不表達造血細胞表面抗原如CD34、CD45、CD11a、CD14。如果能找到更特異性標記物，就可以獲得更純的MSCs，這對后續(xù)的實驗步驟所得的實驗數(shù)據(jù)有重要影響。前2種方法分離所獲得的細胞純度較低,但具有良好的細胞分化能力。應用流式細胞儀技術(shù)和磁性分選技術(shù)針對細胞表面標志進行富集和分離,分選效率和純度均較高[8-9]。

3.3 MSC體外誘導成視網(wǎng)膜細胞

目前國內(nèi)外主要用生長因子誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜細胞。Anthony K等[8]發(fā)現(xiàn)EGF、taurine或activinA體外誘導大鼠MSCs，有20%~32%表達視網(wǎng)膜光感受器細胞的表面抗原視紫紅質(zhì)。Anthony K等[8]應用activinA（活化蛋白A），牛磺酸和EGF對成人CD90+MSCs體外誘導分化后，20%-32%的細胞表達感光細胞特異標志―視紫紅質(zhì)，視蛋白，recoverin。非視網(wǎng)膜來源的，可替代視網(wǎng)膜細胞功能的自體細胞是細胞移植治療視網(wǎng)膜變性疾病和視神經(jīng)損傷的理想種子細胞，目前國外有少量研究發(fā)現(xiàn)MSCs視網(wǎng)膜下移植可誘導分化為視網(wǎng)膜細胞，但由于體內(nèi)局部微環(huán)境復雜，影響因素繁多，移植細胞的分化方向不確定，往往無法定向分化成所需細胞，存在表達增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的潛在危險。而體外誘導MSCs定向分化為視網(wǎng)膜細胞仍是當前研究的難點。國內(nèi)外僅數(shù)篇文獻報道用視網(wǎng)膜片培養(yǎng)上清液體外誘導MSCs分化為視網(wǎng)膜樣細胞，但均未對培養(yǎng)上清液成分進行具體分析檢測，分析其有效成分。本實驗探索體外誘導MSCs定向分化的新途徑，可進一步進行蛋白質(zhì)組學技術(shù)檢測不同誘導微環(huán)境的蛋白差異，為構(gòu)建MSC體外誘導分化為視網(wǎng)膜細胞的微環(huán)境提供理論支持。這不僅解決了直接將MSCs體內(nèi)移植分化方向不確定的問題，以及應用異體的人視網(wǎng)膜片誘導時可能引發(fā)排斥反應等問題。

參考文獻：

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[2] 宋憶淑，賀 冰，費向東，等. 可見光照射致培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細胞凋亡的超微結(jié)構(gòu)觀察[J].中國老年學雜志,2001,25(1):69-70.

[3] Tropepe K, Brenda LK,Bernard JC, et al. Retinal stem cells in themammalian eye[J].Science, 2000,287:2032-2036.

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情感故事片范文第2篇

經(jīng)過長達兩年的努力，益達微電影終于迎來了收官——男女主角歷經(jīng)一路的酸甜苦辣，分離與重逢，再次走到一起。

這是一段故事，更是一則廣告。

從抵制到期待，如今廣告主千姿百態(tài)、幻影叢生的營銷手段，已經(jīng)在不知不覺中充滿了你的視線。

廣告微電影發(fā)力

2011年10月份麥田映畫工作室出品的《愛瘋時代》，是這一行中的探路者?！叭ツ隁q末的累計點擊量達到2000多萬，進了年度排名前三?！闭劦竭@個廣告片，導演麥田掩不住驕傲。表面看來，《愛瘋時代》是一部解讀當下iPhone用戶心理的微電影，但在“不要讓世界因科技而冷漠”的宏大命題下，實則卻是與小米手機合作的廣告——雖然“小米”的字眼只在臨近片尾出現(xiàn)過一次。

新媒體的誕生，將傳統(tǒng)廣告拉下神壇，網(wǎng)絡(luò)成了營銷界的第二樂土。麥田們從草根中崛起，通過依托品牌，意圖找到與老百姓生活息息相關(guān)的情感故事，展現(xiàn)品牌價值觀以及人文關(guān)懷。

麥田稱之為“廣告電影”。

與傳統(tǒng)廣告不同，廣告微電影最大的特點就是故事性。“我們不做產(chǎn)品，只挖掘品牌價值?！丙溙飳τ浾弑硎?，“我們相信每個品牌的背后都有一個感人的故事，只要找到與公眾的關(guān)聯(lián)性，就能引起共鳴?！倍蛑v述故事的需要，勢必引發(fā)其另一特點——廣告微電影時間延長，一般會保持在3分鐘左右?！稅郫倳r代》作為麥田的一次探索性嘗試，時長達到10分45秒。

同樣以網(wǎng)絡(luò)作為傳播平臺，但廣告微電影因其時長的因素，并不能像視頻前后貼片廣告一樣硬生生地推給受眾，只能以獨立視頻的形式呈現(xiàn)。正因此，一個優(yōu)質(zhì)的劇本創(chuàng)意才能在自傳播的網(wǎng)絡(luò)環(huán)境下成為賺取點擊量、擴大傳播面的制勝砝碼。

“當時如果不借助蘋果，單純做小米，肯定達不到這樣的效果?！丙溙锾寡裕斑@是一次借力打力。”

視頻網(wǎng)站提供沃土

組織專業(yè)的團隊，拍攝企業(yè)故事片成為近兩年的趨勢。這其中少不了“為自己代言”的聚美優(yōu)品。2012年11月7日，聚美優(yōu)品一則時長達1分39秒的新廣告片開始在網(wǎng)絡(luò)上被大量轉(zhuǎn)播。緊接著，并未滿足于此的聚美優(yōu)品又將廣告片搬到了湖南衛(wèi)視的黃金時段，引起熱議。

但不是所有的企業(yè)都有敢于如此砸錢的魄力與資本。視頻網(wǎng)站的興起，給了廣告主相比電視、報紙更廉價的營銷平臺。通過自行上傳視頻，引發(fā)受眾的關(guān)注。不管是借著江南Style的東風，各企業(yè)主大跳騎馬舞，還是桔子水晶酒店CEO“屌叔”吳海聚集40位猛男挑戰(zhàn)節(jié)操下限的《女王的盛宴》，都能在短時間內(nèi)通過結(jié)合熱點，贏取一定的點擊量。

據(jù)艾瑞咨詢提供的數(shù)據(jù)，近三年來網(wǎng)絡(luò)媒體廣告市場規(guī)模以55%左右的年增長率成長起來，2012年預計可達到793.5億人民幣，基本與電視廣告861.3億人民幣持平。而在2005年，網(wǎng)絡(luò)媒體的廣告市場規(guī)模才只有40.7億人民幣，連電視廣告的零頭都比不過。這其中，視頻網(wǎng)站的興起功不可沒。

在艾瑞咨詢最新的《2012年第三季度中國網(wǎng)民行為&網(wǎng)絡(luò)廣告監(jiān)測數(shù)據(jù)》中顯示，2012年第三季度視頻網(wǎng)站的廣告收入攀升至7.9億，同比去年增幅為47.8%，2012年增速領(lǐng)先其他媒體類別，展現(xiàn)蓬勃的發(fā)展態(tài)勢。

“電視廣告從2007年開始，每年基本上都提價10%，很多企業(yè)已經(jīng)逐步退出了。另一方面，國家限制電視劇插播廣告以及黃金時段的控制，電視臺也會淘汰一部分企業(yè)。還有隨著人們收視習慣的改變，視頻網(wǎng)站的影響力越來越大，電視開機率也會降低。”引力傳媒股份有限公司市場總監(jiān)侯明廷對記者表示。

“屌絲氣質(zhì)”

從最初自己DV拍攝，感受網(wǎng)絡(luò)的魅力，到成立一個涵蓋攝影、美術(shù)、燈光等近30人的工作室，麥田用五年的時間見證了整個網(wǎng)絡(luò)環(huán)境的改變。

拍攝廣告微電影，已經(jīng)在今年為麥田帶來盈利。而麥田表示，相比傳統(tǒng)電視廣告而言，廣告微電影的制作成本更便宜，但消耗的時間長。從創(chuàng)意、策劃到執(zhí)行，最短3個星期，長則1至2個月。

“之前，寶馬的mini cooper找我們想給拍一個片子，但是因為給的費用太少，我們根本做不到他想要達到的效果，所以就給拒了?！丙溙镎J為廣告主雖然在逐漸覺醒，但對此的投入力度與認可度都不算高。在成熟的廣告領(lǐng)域，明星、資金、專業(yè)都不是問題。相比較之下，這個領(lǐng)域還充滿了“屌絲氣質(zhì)”。

同時，因其獨立視頻的形式，也造成在傳播度上的不可控性。“這類廣告點擊量達到1.5%就算不錯了，一般情況下為0.6%至0.8%?！焙蠲魍τ浾弑硎?。當然，除了創(chuàng)意與口碑之外，視頻網(wǎng)站也承擔一定的推手作用。愛奇藝作為視頻網(wǎng)站的后起之秀，一直秉承著“高姿態(tài)”，未開放用戶上傳視頻功能。據(jù)愛奇藝內(nèi)容戰(zhàn)略合作總監(jiān)孫燕軍介紹，專門設(shè)置的廣告頻道上線不到100天，更多的是作為品牌類廣告的展示?！皬男蕾p性、藝術(shù)性考量通過試鏈等方式進行內(nèi)容的推介”，與投入性廣告嚴格區(qū)分開來，并未與廣告主存在合作模式，但未來會希望能與廣告主、內(nèi)容方達成合作。

自傳播的網(wǎng)絡(luò)形態(tài)，已經(jīng)讓麥田映畫從最初躲在幕后替他人做嫁衣的執(zhí)行團隊，轉(zhuǎn)變?yōu)樽约洪_發(fā)客戶，獨立的制作、營銷公司?！暗乾F(xiàn)在，廣告微電影的銷售人才不多。這需要既懂電影運作，又懂傳播規(guī)律，要求不低?！丙溙镄ΨQ，“所以現(xiàn)在都是我自己去談客戶?！?/p>

情感故事片范文第3篇

的等待與呼喚

與其說被神秘的命運牽引，不如說她一直在找尋那個最真實的自己，直到她遇見了。

她是戴瑋，獅子座的哈爾濱女子，曾被稱為央視最美女導演，先后執(zhí)導了四十多臺大型文藝晚會；拍攝過近百首音樂電視作品……事業(yè)抵達巔峰，有名有利，但她真正快樂嗎？

答案是：不。

戴瑋漸漸厭倦了這份“很順”的工作，動了離開央視的念頭。這個念頭到了1999年秋天，逐漸明晰而確定。彼時，她來到雪域高原，擔任一場名為“雪域歡歌”的文藝晚會的總導演，為了準備這臺晚會，戴瑋特地到各地采風，深入藏民生活、聆聽藏族音樂。美麗的自然人文風情，狠狠襲擊著戴瑋的心，她的靈魂為之激動、欣喜。

晚會無疑是很成功的，但戴瑋并沒有很快回到北京邀功領(lǐng)賞，而是一頭扎進的懷抱，聆聽大地的律動。

第一次踏入大昭寺，戴瑋著迷于那些虔誠的信徒：是什么力量促使他們不畏千辛萬苦來此朝圣？他們的臉上泛著平和寧靜的光芒，戴瑋想走近他們的內(nèi)心世界，心懷敬畏。

走出大昭寺時，天色已晚，一個年輕的喇嘛倚在門口，他的目光單純清澈，就像的天空，戴瑋心想，他在穿上袈裟的時候，能否知曉自己的命運走向？他是否有過不甘和掙扎？或許，這只是一種世俗的追問。城市里的人大多被欲望牽著鼻子走，體會不到真正自由的心境。

戴瑋頓時覺得，沒有地方比更適合重新梳理自己的人生目標。

幾天后，戴瑋和朋友去當雄縣采風，中午在一家農(nóng)戶吃飯，他們十分熱情，給他們端上最美味的佳肴。農(nóng)戶家有個七歲左右的小女孩，扎著長長的辮子，漂亮，害羞，不停地給戴瑋和朋友們倒酥油茶，臨走時，戴瑋送了一個小禮物給女孩，她十分開心，笑時露出潔白整齊的牙齒，像遠處山巒的雪。

小女孩追趕著送他們，藏族司機回頭說，我們采完風還會經(jīng)過你家門口，說不定還要到你家喝茶呢，你家的茶很好喝。小女孩的臉上又露出羞澀的笑容，停下腳步朝戴瑋一行揮手。

黃昏，夕陽像金色的絲綢鋪在的草原，經(jīng)過農(nóng)戶區(qū)時，中午的小女孩正在村莊門口翹首等待，看到他們的車子經(jīng)過，她揮舞著小小的雙手招呼。

此情此景，逼出戴瑋的眼淚。被人信任和等待，是多么幸福的事??！

就是這么一件件的小事，讓戴瑋對的認識逐漸豐滿起來。她萌生了一個愿望，將自己在見過的每一個人，包括那個藏族小女該，那個小喇嘛，表現(xiàn)在自己的作品當中。具體以哪種藝術(shù)載體來體現(xiàn)呢？戴瑋想到了小說、電視劇和電影。最后，她選擇了電影。不久，戴瑋離開了央視。

拍攝前，戴瑋這樣寫道：把自己放下，腳踏實地去做，給世界留下更多美好、善良和感恩的情懷，而不是抱怨、挑剔或者糟糕的批判，為了時代，為了文化表率，為了一個導演的本能、職業(yè)道德與社會承擔……

不為承諾，只為夢想

《岡拉梅朵》是戴瑋的第一部題材電影?？赐陝”竞?，她的創(chuàng)作欲望一下被激發(fā)，她希望拍出一部濃墨重彩描繪現(xiàn)代風情的情感故事片，其中包含自己的成長體驗和對的熱愛。

2005年初，戴瑋組建好制作班子，找來好朋友、大名鼎鼎的音樂人撈仔作曲。一班人馬正準備進藏拍攝，誰料傳來消息，投資方突然撤了資。此時，戴瑋箭已上弦，雄心萬丈，她決定不管有沒有人投資，都要再組班子把她心中的這個夢完成。好友撈仔對她說：“我跟著你。”戴瑋大為感動，信心倍增。

為了《岡拉梅朵》能盡早開拍，戴瑋將自己十幾年的積蓄拿了出來。她的親朋好友都為她捏了把汗，中國嚴肅電影市場境況慘淡，像張揚、賈樟柯、滕文驥這樣的名牌導演的電影作品都免不了遭受敗績，更不要說沒有拍過電影的戴瑋了，誰會看好她？她的積蓄很可能成為泡影。

戴瑋完全有理由、也有條件回頭，去國內(nèi)任何一家電視臺同樣風光無限，但她沒有這樣做，反而連自己在北京的住房也抵押出去換了錢。

一番周折，終于湊齊資金的30%，戴瑋開始準備前期拍攝。她的執(zhí)著與瘋狂感動了一個中學同學，她目前已是北京一家著名文化公司的高管，她同意向《岡拉梅朵》投資。

《岡拉梅朵》是中國第一部現(xiàn)代題材的音樂電影，影片女主角安羽是一個后天失聲的啞女，她來到后所發(fā)生的悲歡離合的故事都是由音樂貫穿起來的，這是一個非常大膽而有突破性的嘗試，在中國的電影史上沒有人做過，因而對每一個參與者都是巨大的挑戰(zhàn)和誘惑。

2005年10月26日，戴瑋帶隊進藏，開始正式拍攝。此時，已進入冬季，白雪皚皚。戴瑋的拍攝，要看老天的臉色行事，可她又必須在年底之前封鏡。拍攝經(jīng)費對于她來說更是橫在喉嚨處的一把利刃，隨著每一天的過去，利刃都會向喉嚨切進。

那段時間，戴瑋幾乎是揉碎自己的心靈在拼搏，每天只睡兩個小時，她在有些憔悴的臉上涂了厚厚一層防曬霜，白得嚇人，看到同事怪怪的眼神，她嘀咕道：“我的臉是不是完蛋了？真的沒法兒見人了?！?/p>

最先確定的女主角是李小璐，她是冒著很大的風險前來拍攝，因為小璐從小心臟不太好，她這次進藏遭到除父親以外的全家人的反對，李父在反復看了劇本、反復斟酌了李小璐的身體情況后，決定讓女兒擔當女一號，并親自陪伴女兒進藏。電影里，李小璐演啞女，從頭到尾沒有一句臺詞，可影片又要她依靠神情和肢體把臺詞說出來，這對演員的功力要求很高，所以，她和父親都愿意接受挑戰(zhàn)。

但是，依然困難重重，持續(xù)的高原反應導致李小璐不能繼續(xù)拍攝，不得不更換主角。期間，戴瑋又不幸出了車禍，有些工作人員難以堅持，拋棄曾向往的青稞酒、酥油茶的生活，逃回北京。所有的困難如大漠冰雪一般驟然來襲，戴瑋一度想到了放棄。但是，如果放棄不拍了，損失最重的則是朋友的投資，她心里過意不去：“我有勇氣接受任務帶人上去，現(xiàn)在卻沒有勇氣堅持下去，這不是我做人的標準?！?/p>

戴瑋堅持、擔當，沒有走到絕路，她不會放棄。在，她明白了，明天是未知的，什么都可能發(fā)生，她要做的，就是腳踏實地，咬牙挺胸，做好今天的一切?！袄щy不會因為你是女性就來得更溫柔一些，只因為你是導演是監(jiān)制，所以必須去積極面對，一切的責任都必須去有力承擔?！?/p>

隨后，韓國演員姜世貞替換李小璐，成為女一號，想不到這個異國女子竟能適應高原的復雜氣候，很快投入到拍攝中去，戴瑋懸著的心終于放下來。

傳播愛與美

《岡拉梅朵》歷時三年，拍攝完畢。2008年3月，正式在全國院線上映。同年，該片獲得第十五屆韓國最高藝術(shù)獎――最佳外國導演獎，以及美國中美影展“金天使”獎。國內(nèi)更是好評如潮，被譽為新生代音樂電影地標性作品、廣大“驢友”的旅游寶典。

戴瑋更加篤定自己的選擇：沒錯！這一切都是給予她的。

有次，戴瑋去北京西單附近的一家餐館吃飯，聽到兩個女服務員竊竊私語，“看，她是人！”戴瑋聽了想笑，但回頭看鏡子，她的臉上的確有了些微微的高原紅，皮膚粗糙了，眼睛清澈了。昔日那個在央視舞臺上叱咤風云的美女導演哪里去了？，將戴瑋的人生分割成了兩段，前一段已十分遙遠。

那里有世界上海拔最高的高原，空氣稀薄，陽光熾熱，天藍水凈，愛情單純而直接。剛到北京，戴瑋已開始思念，就像思念她遙遠的家鄉(xiāng)。

重回，戴瑋無意讀到一本小說，是著名作家扎西達娃的《香巴拉的貓》，描寫第二次世界大戰(zhàn)初期，美國飛虎隊成員滇緬抗戰(zhàn)時，一架戰(zhàn)機在北部墜毀，幸存的飛行員在大草原上邂逅一個年輕美麗的藏族單身母親，她也被部族拋棄，兩人在逃亡之路上演繹了一出凄美的愛情故事……戴瑋看了兩遍，每次都感動得淚流滿面，她覺得這部作品讓她產(chǎn)生極大的共鳴感。就像文中的女主人公一樣，這個美麗、神秘、充滿誘惑和吸引的土地，讓她受盡折騰，卻又無法舍棄，深深眷念，深深愛著。

戴瑋給作家扎西達娃打電話：“你的這部小說太好了，我希望以后能拍它！”扎西達娃有點不屑：“拍電影，可沒那么簡單，這可是有時間、有年代感的戲，還有飛機的戲，你一個女導演可能有點難?！痹鬟_娃的話，讓戴瑋覺得大受打擊。不過，沒多久，兩個老熟人便坐在了一張桌上，戴瑋最終用自己的真誠和專業(yè)感動了扎西達娃，她順利簽下《香巴拉的貓》的電影版權(quán)，取名《往事》。

相較《岡拉梅朵》，《往事》的拍攝十分順利，投資方和演員不請自來，這無疑是對戴瑋的一種肯定。何潤東、小宋佳等知名演員的加盟，更是讓《往事》剛剛開機便進入了公眾視野。

這部電影里，戴瑋完全拋開了個性的喜好和成長經(jīng)驗，更遵循于故事本身。以宏大的歷史事件為背景，不動聲色地講完一個經(jīng)典的故事，電影風格秉承了戴瑋一貫溫婉細膩的風格，對畫面和音樂的把控尤其出彩。

2011年4月8日，《往事》上映。一位看過影片的觀眾激動地說：“在如今浮躁的大環(huán)境下，很多男性導演的作品都令人十分失望，卻還有像戴瑋這樣認認真真拍電影的女導演，把電影當做一種信念來做，值得人們尊敬?！?/p>