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細(xì)胞生物學(xué)的任務(wù)范文第1篇

1.1主要試劑及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液DMEM/F12及DMEM(高糖)、胎牛血清、重組表皮生長因子（EGF）和堿性成纖維生長因子（bFGF-2）均購于GIBCO公司。含綠色熒光蛋白GFP的慢病毒載體表達(dá)質(zhì)粒(pGC-FU)購于GENECHEM公司，pORF-hIL-12G2質(zhì)粒購于InvivoGen公司，胰酶、DEPC、Tris堿、EDTA均購于Sigma公司，抗人CD133/PE抗體及抗人CD44/APC抗體購于BDPharmingen公司，BCA蛋白定量試劑盒購于ThermoFisherScientific，實(shí)驗(yàn)用6-8W齡雌性裸鼠由第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，由該中心負(fù)責(zé)飼養(yǎng)和管理。

1.2培養(yǎng)、分離、鑒定結(jié)腸癌CSCs結(jié)腸癌SW480細(xì)胞株購于ATCC，在干細(xì)胞條件培養(yǎng)基中（不含胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基，含20ng/mlEGF、20ng/mlbFGF-2、1×B27和1%青鏈霉素）中篩選培養(yǎng)2周后，流式細(xì)胞儀分選出CD133+/CD44+SW480細(xì)胞作為結(jié)腸CSCs，分析其自我更新及分化。分選出的CSCs用干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)于37°C、5%CO2孵箱中，細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、克隆形成能力、成球能力及NOD/SCID體內(nèi)成瘤能力鑒定其“干性”特征[8]。

1.3構(gòu)建IL-12過表達(dá)慢病毒模型及轉(zhuǎn)染CD133+/CD44+SW480細(xì)胞PCR擴(kuò)增含IL-12p70基因片段的pORF-hIL-12G2質(zhì)粒獲得IL-12基因，通過酶切及連接構(gòu)建重組IL-12/慢病毒質(zhì)粒，取陽性克隆搖菌后行PCR鑒定，酶切鑒定及測序。鑒定正確的克隆搖菌擴(kuò)大培養(yǎng)，用除內(nèi)毒素大提試劑盒提取質(zhì)粒DNA，293T細(xì)胞包裝病毒，IL-12/慢病毒顆粒感染CD133+/CD44+SW480細(xì)胞，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞稱為“慢病毒/IL-12細(xì)胞”[8]。

1.4IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs生物學(xué)特性的影響1.4.1IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs分化的影響（SP免疫組化試劑盒檢測CK20）為了觀察IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs的體外分化能力的影響，我們?nèi)∞D(zhuǎn)染IL-12過表達(dá)慢病毒質(zhì)粒的細(xì)胞及未轉(zhuǎn)染的CD133+/CD44+SW480在條件培養(yǎng)基中形成的克隆細(xì)胞球，移入含10%胎牛血清培養(yǎng)基中連續(xù)觀察其生長情況，對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行免疫組化染色，顯微鏡觀察后照相。結(jié)果判斷：被測細(xì)胞胞漿染色黃-棕色為陽性表達(dá)。

1.4.2IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs克隆形成能力的影響將轉(zhuǎn)染IL-12過表達(dá)慢病毒質(zhì)粒及未轉(zhuǎn)染的CD133+/CD44+SW480細(xì)胞計(jì)數(shù)后，調(diào)整細(xì)胞濃度。各取10000個(gè)兩組細(xì)胞分別接種6孔板中，加入適量條件培養(yǎng)基，5％CO2，37°C培養(yǎng)。每隔1天半量換液1次。顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，7d后終止培養(yǎng)。

1.4.3IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs侵襲性的影響實(shí)驗(yàn)分組：慢病毒/IL-12轉(zhuǎn)染組；空載體轉(zhuǎn)染組；未轉(zhuǎn)染組（即空白對(duì)照）。使用前水化Matrigel基質(zhì)膠，然后基質(zhì)膠包被Transwell小室，置于37°C，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育。薯蕷皂甙元處理后24h接種細(xì)胞，1×104/ml細(xì)胞分別接種基質(zhì)膠包被的小室，無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞加入上層小室，含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞加入下層小室，將小室置于無菌24孔板中，加入250μl培養(yǎng)基。下室加入500μl培養(yǎng)基，5%CO2，37°C靜置培養(yǎng)48h。取出小室，PBS輕輕淋洗，用棉頭拭子小心移走膜上層的細(xì)胞，95%乙醇侵入到膜下層的細(xì)胞40min。PBS淋洗3次，蘇木素染色。倒置顯微鏡（×200）下計(jì)數(shù)微孔膜下層的細(xì)胞，每孔隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)數(shù)每個(gè)視野細(xì)胞數(shù)目，每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。14.4IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs體內(nèi)腫瘤形成能力的影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵循第三軍醫(yī)大學(xué)臨床學(xué)院倫理要求（批準(zhǔn)號(hào)ID，SCXK（軍隊(duì)）2007015）。6-8周雌性NOD/SCID小鼠培養(yǎng)于無菌環(huán)境中，慢病毒感染后48h，NOD/SCID小鼠（n=15）皮下注射慢病毒/IL-12細(xì)胞5×103，或空載體轉(zhuǎn)染的結(jié)腸CSCs5×103。接種后觀察小鼠毛色、食欲、大小便等基本生命狀況，30d后評(píng)估腫瘤形成。試驗(yàn)結(jié)束后切取腫瘤組織，稱重并作相應(yīng)檢測，游標(biāo)卡尺測腫瘤長短徑，腫瘤體積=長×寬2。

1.5IL-12抑制CD133+CD44+SW480細(xì)胞生存機(jī)制研究

1.5.1Westernblot檢測結(jié)腸CSCs轉(zhuǎn)染前后STAT6、p-STAT6、survivin、IL-12和IL-4蛋白表達(dá)蛋白抽提試劑盒-II提取細(xì)胞上清液總蛋白，濃縮上清至原體積的1/30～1/10，蛋白樣品按照1：4的比例加入5×上樣緩沖溶液，100℃變性5min，分裝。BCA法測蛋白濃度，酶標(biāo)儀測定550nm處吸光度值。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。SDS-PAGE垂直電泳，200mA恒定電流轉(zhuǎn)膜80～90min。抗原-抗體反應(yīng)及化學(xué)發(fā)光法顯色，BIO-RAD凝膠成像分析系統(tǒng)掃描及圖像分析，相對(duì)灰度值表示蛋白相對(duì)含量。

1.5.2IL-12對(duì)結(jié)腸CSCs凋亡的影響收集轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞，PBS洗2次，1000r/min，離心5min，棄上清。用不含EDTA的消化液消化貼壁細(xì)胞。收集的各組細(xì)胞加入500μl結(jié)合緩沖液中重懸細(xì)胞，再加入適量AnnexinV-FITC和PI，同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照和補(bǔ)償對(duì)照（分別單染），室溫避光孵育20min。1000r/min，離心5min，棄上清，加入500μl結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞，流式細(xì)胞儀測定每個(gè)樣本中凋亡細(xì)胞所占百分比，每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。腫瘤抑制率=對(duì)照組瘤重-治療組瘤重/對(duì)照組瘤重×100%。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)量資料數(shù)據(jù)以x±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，使用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2結(jié)果

2.1慢病毒-IL-12質(zhì)粒構(gòu)建及在CD133+/CD44+SW480細(xì)胞中表達(dá)前期結(jié)果證實(shí)慢病毒-IL-12表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建成功，慢病毒/IL-12細(xì)胞上清液高表達(dá)IL-12mRNA和蛋白[7]，為我們進(jìn)一步探究IL-12體內(nèi)作用及機(jī)制打下基礎(chǔ)。

2.2結(jié)腸CSCs過表達(dá)IL-12對(duì)腫瘤球形成能力、侵襲性及分化的影響將CSCs懸浮于無血清的干細(xì)胞培養(yǎng)液中，腫瘤球形成后光學(xué)顯微鏡觀察腫瘤球數(shù)量，結(jié)果顯示IL-12降低了結(jié)腸CSCs腫瘤球形成能力，轉(zhuǎn)染慢病毒-IL-12的CSCs不能形成明顯的腫瘤球（圖1A）。但使用IL-12抗體阻斷后能恢復(fù)腫瘤球形成（圖1B）?？蛰d體轉(zhuǎn)染的SW480CSCs形成的腫瘤球更大更緊密（圖1C），但正常結(jié)腸細(xì)胞WM35不能形成腫瘤球（圖1D）。另一方面，與對(duì)照組相比（圖2B），IL-12增加CSCs分化標(biāo)志CK20表達(dá)（圖2A）。與SW480CSCs相比，慢病毒/IL-12轉(zhuǎn)染CSCs的侵襲性降低40%(表1）。

2.3IL-12抑制NOD/SCID小鼠原發(fā)腫瘤生長研究發(fā)現(xiàn)慢病毒/IL-12減緩了CSCs腫瘤生長。慢病毒/IL-12轉(zhuǎn)染的CSCs形成的腫瘤體積顯著低于對(duì)照組[（189±21）vs（1785±32）mm3，P<0.05]，質(zhì)量顯著輕于對(duì)照組（P<0.01）。

2.4IL-12減緩結(jié)腸CSCs增殖，促使其凋亡IL-12轉(zhuǎn)染也影響細(xì)胞凋亡及增殖。流式細(xì)胞分析顯示，慢病毒/IL-12形成的腫瘤細(xì)胞周期發(fā)生改變，G1期細(xì)胞增加[（68.8±3.6）%vs（52.4±2.8%）]，而S期細(xì)胞降低[（22.6±2.8）%vs（38.6±4.1%）]（圖5A），與對(duì)照組相比，凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增加[(45.2±5.6%vs(4.1±1.2%)]（圖6B）。

2.5結(jié)腸CSCs表達(dá)IL-4和STAT6,IL-12抑制IL-4/STAT6信號(hào)途徑Westernblot結(jié)果顯示，CSCs表達(dá)IL-4升高，表明CSCs內(nèi)存在IL-4自分泌信號(hào)。值得注意的是，CSCs內(nèi)STAT6被激活。慢病毒/IL-12降低IL-4/STAT6及survivin產(chǎn)生（圖4）。

3討論

結(jié)腸癌是常見的惡性腫瘤之一，隨著人們生活水平提高，飲食結(jié)構(gòu)改變，其發(fā)病率有增加趨勢，尤其在發(fā)達(dá)國家及發(fā)展中國家。直至目前，結(jié)腸癌主要的治療手段仍是手術(shù)切除，且手術(shù)較其他治療效果更佳，尤其是早期腫瘤，但腫瘤轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)仍是晚期患者治療失敗的主要原因。最近研究表明，CSCs能夠始發(fā)免疫缺陷小鼠腫瘤生長[1-2]，并與腫瘤轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)相關(guān)。從理論上講，靶向CSCs治療能夠徹底消除腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，因此靶向CSCs的腫瘤治療策略將比目前的傳統(tǒng)治療方法更有效的根治腫瘤，減少復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的發(fā)生率，為腫瘤的靶向診治提供了新靶標(biāo)，為根治腫瘤帶來了新希望[14]。免疫抑制仍是多數(shù)預(yù)期較好的腫瘤治療手段的主要障礙，而細(xì)胞因子失衡是機(jī)體免疫功能紊亂的主要原因，并導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展及復(fù)發(fā)[15]。關(guān)于細(xì)胞因子的抗瘤免疫反應(yīng)相關(guān)研究包括IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-12等，已有研究表明，IL-12能有效地增多種腫瘤的抗瘤免疫反應(yīng)，但I(xiàn)L-12對(duì)CSCs生存及侵襲性的作用并不清楚。本研究報(bào)道IL-12低水平表達(dá)/不表達(dá)與結(jié)腸癌進(jìn)展的相關(guān)性，證實(shí)IL-12對(duì)直接限制CSCs惡性表型的潛在益處。本研究中，我們成功構(gòu)建含IL-12cDNA的重組慢病毒質(zhì)粒，用包裝病毒的工具細(xì)胞293T細(xì)胞包裝純化后，獲得較高滴度的病毒顆粒，將其轉(zhuǎn)染CD133+/CD44+SW480細(xì)胞，慢病毒/IL-12細(xì)胞高表達(dá)IL-12mRNA及蛋白，說明穩(wěn)定轉(zhuǎn)染IL-12的結(jié)腸CSCs系建立，同時(shí)也證明慢病毒作為基因研究的載體具有低毒、高效的優(yōu)勢。結(jié)果表明，IL-12損害干性維持部分是因?yàn)橐种艭SCs增殖；而且，IL-12降低分化標(biāo)志CK20表達(dá)，證實(shí)IL-12介導(dǎo)促進(jìn)分化的信號(hào)通路；與SW480細(xì)胞相比，慢病毒/IL-12細(xì)胞的侵襲性降低了約40%，表明IL-12顯著抑制CSCs侵襲性。

細(xì)胞生物學(xué)的任務(wù)范文第2篇

[關(guān)鍵詞]RGD；人牙周膜細(xì)胞；黏附；增殖；堿性磷酸酶

[中圖分類號(hào)]Q813.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1008-6455（2013）01-0054-03

The biological effects of arginlie-glycine-aspartic-Serine acid on periodontal ligament cell

BI Ying-chun，HE Yu-hong，XI Lan-lan

（Department of Stomatology，General Hospital of Jinan Military Area Command of Chinese，Jinan 250031，Shandong，China）

Abstract： Objective To observe the effects of arginlie-glycine-aspartic-Serine （RGDS） peptides on the biological behaviors of human periodontal ligament cells（PDL） so as to discuss the mechanism of RGDS and the feasibility of its applications in periodontal therapy. Methods The effects of RGDS on periodontal ligament cells adhesion，extension and as well as the effects on ALP were observed by cellular culture and solid bond phase analysis. Results RGDS could promote PDL adhesion and extension with significance at the concentration of 25～100mg/L（P

Key words：arginlie-glycine-aspartic；human periodontal ligament （PDL） cells； adhesion； proliferation； alkaline phosphatase

精氨酸 -甘氨酸-天門冬氨酸（Arg-Gly-Asp， RGD）三肽是多種細(xì)胞跨膜蛋白整合素的特異性配體，許多黏附蛋白所共有的細(xì)胞間及細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)識(shí)別的最小序列，這一序列在介導(dǎo)細(xì)胞黏附、遷徙和生長方面起重要作用。牙周膜細(xì)胞在牙根面上的附著和增殖是牙周組織新附著的關(guān)鍵，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖怯^察離體細(xì)胞培養(yǎng)條件下，外源性RGDS對(duì)牙周膜細(xì)胞的影響，為進(jìn)一步的臨床研究工作提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料：RGDS（Sigma）， 96孔培養(yǎng)板（Coster）， DMEM培養(yǎng)液和胰蛋白酶（Gibco），胎牛血清（FCS杭州四季青生物工程研究所）， 酶聯(lián)免疫檢測儀（DG3022A）， 牛血清白蛋白（BSA，博士德公司），噻唑鹽（MTT Sigma），ALP試劑盒，倒置顯微鏡（Olympus，Japan）。

1.2 人PDL的體外培養(yǎng)：取13～17歲因正畸需要拔除的新鮮前磨牙，隨即在無菌條件下用PBS緩沖液（含青、鏈霉素各1000U/ml）浸泡5～10min，并沖洗2次，除去血液，刮取牙根中1/3的牙周膜組織，剪成1mm3碎塊，均勻鋪于培養(yǎng)瓶底，瓶底向上，加入適量含100ml/L胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，在飽和濕度、50ml/LCO2、950ml/L空氣、37℃標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下孵育2h，翻轉(zhuǎn)，培養(yǎng)至長出牙周膜細(xì)胞。用2.5g/L胰蛋白酶消化法進(jìn)行傳代，用免疫組化SABC法進(jìn)行角蛋白和波形絲蛋白染色，波形絲蛋白染色陽性，角蛋白染色陰性，證明為中胚層組織來源。取第4代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

1.3 PDL細(xì)胞黏附性的測試--固相結(jié)合分析[1]：將RGDS溶于PBS液，分別制成100mg/L，50mg/L， 25mg/L，12.5mg/L4種濃度，每濃度為一實(shí)驗(yàn)組。將各濃度組按每孔50μl包被96孔板，每種濃度4孔，陰性對(duì)照為10g/L BSA。將96孔板置于4℃，過夜。用PBS液洗96孔板各孔2次，加10g/L BSA，37℃封閉1h，PBS再洗2次。取第4代人PDL細(xì)胞，2.5g/L胰酶消化，離心，收集細(xì)胞，用不含血清的DMEM培養(yǎng)液吹懸細(xì)胞，形成5×108/L的細(xì)胞懸液，以每孔100μl接種于96孔板，37℃，50ml/LCO2條件下培養(yǎng)120min。取出培養(yǎng)板，PBS洗2次以去除未貼壁的細(xì)胞，2.5g/L胰酶消化，離心，將細(xì)胞懸浮于200μl無血清DMEM，血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)算細(xì)胞總量。

1.4 PDL細(xì)胞伸展性的測試：實(shí)驗(yàn)分組及96孔板的包被與實(shí)驗(yàn)方法1.3相同，用無血清DMEM調(diào)整細(xì)胞濃度至107/L，每孔接種100μl， 標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下孵育120min，倒置顯微鏡下觀察各孔并照相。計(jì)數(shù)伸展細(xì)胞（即至少有一個(gè)胞漿突起的細(xì)胞）數(shù)和未伸展細(xì)胞數(shù)，每組至少計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算伸展細(xì)胞的百分率。

1.5 RGDS對(duì)PDL細(xì)胞增殖的影響：實(shí)驗(yàn)分組及96孔板的包被與實(shí)驗(yàn)方法1.3相同，用無血清DMEM調(diào)整細(xì)胞濃度至107/L，每孔100μl接種于96孔板，10ml/LDMEM培養(yǎng)24h后，PBS 洗去未黏附細(xì)胞，重新加入10ml/L胎牛血清DMEM100μl，將96孔板置37℃、50ml/LCO2條件下繼續(xù)培養(yǎng)5天后，MTT法測不同濃度RDGS對(duì)PDL細(xì)胞的影響。

1.6 RGDS對(duì)PDL細(xì)胞堿性磷酸酶（ALP）的影響：將PDL細(xì)胞按1.5的方法培養(yǎng)5天后， PBS洗3次，每孔加1ml/L TritonX-100 50μl，4℃過夜。次日每孔加堿性磷酸酶抗體100μl，37℃、50ml/LCO2孵育30min，加0.2mol/LNaOH 50μl終止反應(yīng)。酶聯(lián)免疫檢測儀410nm檢測A值。

1.7 數(shù)據(jù)分析：運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS10.0進(jìn)行組間t檢驗(yàn)， P

2 結(jié)果

2.1 RGDS對(duì)PDL細(xì)胞黏附性和伸展性的影響：如表1所示，隨著RGDS濃度增加，其促進(jìn)PDL細(xì)胞的黏附率的作用逐漸增強(qiáng)，當(dāng)濃度為12.5mg/L時(shí)，與對(duì)照組相比較，既有促進(jìn)細(xì)胞黏附作用（P

細(xì)胞伸展性實(shí)驗(yàn)也說明，在RGDS濃度為12.5mg/L時(shí)，即有促進(jìn)細(xì)胞伸展功能（P

2.2 RGDS對(duì)PDL細(xì)胞增殖和ALP的影響：RGDS在50～100mg/L可明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖，濃度在25～100mg/L明顯提高HPDL細(xì)胞的ALP的活性。見表2。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用固相結(jié)合分析技術(shù)，將RGDS固定于96孔板上，為排除血清中某些因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，在黏附和伸展實(shí)驗(yàn)中采用無血清的DMEM，在增殖和ALP活性檢測時(shí)，因培養(yǎng)時(shí)間較長（5天），采用細(xì)胞能耐受的1%胎牛血清濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：在濃度為25mg/L可顯著促進(jìn)PDL細(xì)胞的黏附、伸展，而較高濃度的促進(jìn)作用卻不明顯，可能在此濃度時(shí)細(xì)胞膜上受置已飽和，再增加RGDS并不能使黏附率明顯上升。而細(xì)胞伸展性也顯示，當(dāng)RGDS濃度達(dá)到25mg/L時(shí)，細(xì)胞在2h的伸展率達(dá)到了50%以上，倒置顯微鏡下可見經(jīng)RGDS處理過的細(xì)胞胞體呈梭行或多角性，既細(xì)胞有一個(gè)以上的突起，呈現(xiàn)良好的伸展?fàn)顟B(tài)。而未經(jīng)RGDS處理的對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)呈圓形，無突起或僅有少量突起，細(xì)胞伸展?fàn)顟B(tài)不佳。

精氨酸-甘氨酸-天門冬氨酸（RGD）是細(xì)胞外基質(zhì)中許多黏附蛋白所共同含有的一個(gè)三肽序列，它是黏附蛋白與細(xì)胞表面特異受體蛋白相互作用的識(shí)別位點(diǎn)。這些細(xì)胞表面膜蛋白被稱為整合素（integrin）。整合素家族的分子都是由α、β兩條鏈由非共價(jià)鍵連接組成的異源雙體，為一跨膜結(jié)構(gòu)，一端連接細(xì)胞內(nèi)的骨架系統(tǒng)，另一端通過RGD識(shí)別位點(diǎn)與細(xì)胞外基質(zhì)連接，形成配體-整合素-細(xì)胞骨架跨膜信息系統(tǒng)，從而將細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞骨架連接起來，引起細(xì)胞內(nèi)一系列生化改變：如：酪氨酸磷酸化、胞漿堿化、鈣離子濃度提高、大量磷脂代謝產(chǎn)物產(chǎn)生等，進(jìn)而影響多種組織細(xì)胞功能調(diào)控，包括胚胎發(fā)育、細(xì)胞的伸展、移動(dòng)、生長、分化、血栓形成、創(chuàng)傷修復(fù)、腫瘤轉(zhuǎn)移等一系列重要生理病理過程[2-3]。1984年，Pierschbacher和Ruolslahti[4]首次用實(shí)驗(yàn)證實(shí)RGDS是纖維連接蛋白與其受體的特異性結(jié)合位點(diǎn)，可促進(jìn)鼠腎成纖維細(xì)胞在生物材料表面的黏附，從此對(duì)于RGD配體與受體相互作用機(jī)制的研究引起了人們的廣泛關(guān)注。許多學(xué)者[5]研究了RGD與生物材料的不同結(jié)合對(duì)細(xì)胞在粘附、增殖、遷徙等方面的影響，顯示RGD與材料表面的穩(wěn)定的連接是促進(jìn)細(xì)胞粘附、增殖的關(guān)鍵。

ALP是參與骨等硬組織形成﹑代謝﹑再生的重要調(diào)節(jié)物質(zhì)，它通過水解磷酸脂﹑ATP及焦磷酸鹽，能去除鈣化抑制物，提供能量，促進(jìn)鈣化[6]。同時(shí)ALP也是細(xì)胞分化活躍和具有成骨能力的標(biāo)志之一[7]。而牙周膜細(xì)胞具骨母樣細(xì)胞特性，ALP也是牙周膜細(xì)胞分化和向成骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化的先決條件。本實(shí)驗(yàn)中，RGDS在濃度25mg/L即可提高牙周膜細(xì)胞ALP水平，這可能是RGDS通過激活整合素受體蛋白，引起胞內(nèi)細(xì)胞骨架改變，從而促進(jìn)細(xì)胞貼壁、伸展，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖，使其分化提前，因此ALP水平的提高極可能是由于牙周膜細(xì)胞數(shù)量增加引起，但無論什么原因，RGDS這種促增殖與分化的作用在牙周組織修復(fù)過程中具有重要意義。

牙周組織再生的一個(gè)中心環(huán)節(jié)是牙槽骨和牙骨質(zhì)的重建及功能性牙周膜的完全再生，即形成牙周新附著，而PDL細(xì)胞作為具有異質(zhì)性的多能干細(xì)胞，其在根面上的黏附、生長、分化是形成新附著的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)RGDS可有效促進(jìn)PDL的黏附、伸展、增殖和分化。已有學(xué)者將含有RGD的七肽固定于I型膠原材料，PDL粘附率明顯提高[8]。因而如果將RGD應(yīng)用于引導(dǎo)牙周組織再生的過程中，則有可能促進(jìn)PDL細(xì)胞在根面上黏附、伸展，激活PDL細(xì)胞成骨功能，促進(jìn)牙周組織再生，這對(duì)體內(nèi)應(yīng)用RGDS促進(jìn)牙周新附著的形成有一定的指導(dǎo)意義。

[參考文獻(xiàn)]

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細(xì)胞生物學(xué)的任務(wù)范文第3篇

一、精選教材 

教材是課程知識(shí)內(nèi)容的載體，是進(jìn)行教學(xué)活動(dòng)的基本材料之一[2，3]。如何選擇和使用教材對(duì)教學(xué)任務(wù)的實(shí)施、完成和對(duì)教學(xué)質(zhì)量的影響至關(guān)重要。通過對(duì)相關(guān)院校的走訪、大量資料的查閱以及結(jié)合本校水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)科的專業(yè)特點(diǎn)、課程學(xué)時(shí)數(shù)以及授課對(duì)象，最終確定以翟中和等主編的《細(xì)胞生物學(xué)》為教學(xué)用教材，并及時(shí)跟進(jìn)該書的新版本。在應(yīng)用該教材的同時(shí)，特別注重其他教科書的參考和補(bǔ)充，如將王金發(fā)編著的《細(xì)胞生物學(xué)》、王堃仁等主編的《細(xì)胞生物學(xué)》、鄭國锠等主編的《細(xì)胞生物學(xué)》、Alberts主編的《Molecular Biology of the Cell》等作為本課程的參考教科書。此外，教師在備課過程中還注重尋求教科書之外的教學(xué)資源，如國內(nèi)外重要學(xué)術(shù)期刊、國內(nèi)外知名大學(xué)《細(xì)胞生物學(xué)》課程網(wǎng)站，特別是國外互聯(lián)網(wǎng)站上與細(xì)胞生物學(xué)知識(shí)相關(guān)的網(wǎng)絡(luò)資源。教學(xué)中將教材、參考教科書以及教科書之外的教學(xué)資源相互補(bǔ)充和凝練，力求教學(xué)內(nèi)容的系統(tǒng)性和前瞻性。 

二、教學(xué)內(nèi)容的遴選 

《生物化學(xué)》、《遺傳學(xué)》、《細(xì)胞生物學(xué)》和《生理學(xué)》等是水產(chǎn)學(xué)院重要的學(xué)科基礎(chǔ)課。這些課程在內(nèi)容上聯(lián)系極為密切，相互交叉和滲透。在《細(xì)胞生物學(xué)》課程的教學(xué)中，既要避免本課程與其他課程內(nèi)容的過度重復(fù)又要保證授課內(nèi)容的完整性、體現(xiàn)細(xì)胞生物學(xué)的核心內(nèi)容。根據(jù)水產(chǎn)學(xué)院的教學(xué)安排以及授課學(xué)生的實(shí)際情況，在《細(xì)胞生物學(xué)》理論課教學(xué)中對(duì)所用教材的內(nèi)容進(jìn)行遴選，合理取舍與合并，最終形成十章作為本校水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)科《細(xì)胞生物學(xué)》理論課教學(xué)內(nèi)容，即：“緒論”、“細(xì)胞的基本知識(shí)”、“細(xì)胞生物學(xué)的主要研究方法”、“細(xì)胞表面”、“細(xì)胞基質(zhì)和內(nèi)膜系統(tǒng)”、“線粒體”、“細(xì)胞骨架”、“細(xì)胞核與染色體”、“細(xì)胞周期和細(xì)胞的分裂與分化”和“細(xì)胞的衰老與凋亡”?！都?xì)胞生物學(xué)》理論課的教學(xué)內(nèi)容遴選后，授課中以細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能為主線，從顯微、亞顯微和分子水平闡述細(xì)胞結(jié)構(gòu)，特別是結(jié)構(gòu)與功能的相關(guān)性，認(rèn)識(shí)細(xì)胞重要生命活動(dòng)的基本內(nèi)容和本質(zhì)，掌握細(xì)胞生物學(xué)的基本概念和基礎(chǔ)理論，在《生物化學(xué)》、《遺傳學(xué)》和《生理學(xué)》課程學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)之上，通過《細(xì)胞生物學(xué)》的教學(xué)，使學(xué)生的知識(shí)體系更加系統(tǒng)化、深入化。 

三、調(diào)整與優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容，因材施教，提高教學(xué)效果 

由于課堂教學(xué)仍然是在校學(xué)生獲取知識(shí)的主要形式[4]，因此教學(xué)內(nèi)容確定后，教師要梳理每一章的教學(xué)內(nèi)容，清晰講授的重點(diǎn)和應(yīng)達(dá)到的具體教學(xué)目的。首先，教師要意識(shí)到第一次課的重要性，它對(duì)激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣有著重要的作用。與其他課程一樣，課程的講授內(nèi)容通常以緒論開篇。但是，不僅許多學(xué)生不重視緒論的內(nèi)容，教師也容易出現(xiàn)缺乏對(duì)緒論講授的激情[5]。教學(xué)中我們將教材[1]中緒論的內(nèi)容重排、調(diào)整與優(yōu)化，收到了較好的教學(xué)效果。授課中將細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展簡史作為最先講授的內(nèi)容，并結(jié)合一些與之相關(guān)的逸聞趣事，激發(fā)學(xué)生對(duì)該門課程學(xué)習(xí)的興趣，使學(xué)生在輕松的氛圍中了解學(xué)科的誕生、認(rèn)識(shí)學(xué)科的發(fā)展與實(shí)驗(yàn)儀器和技術(shù)進(jìn)步的關(guān)系；通過介紹“細(xì)胞學(xué)說”的建立，不僅使學(xué)生掌握了該學(xué)說的基本原理，還使學(xué)生意識(shí)到善于點(diǎn)滴積累以及歸納和總結(jié)對(duì)學(xué)習(xí)和工作的重要性，通過上述學(xué)習(xí)學(xué)生們也弄清了細(xì)胞生物學(xué)最基本的研究內(nèi)容。之后再介紹當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容和研究熱點(diǎn)，并將教材目錄與緒論的內(nèi)容相聯(lián)系，這樣不僅使細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容深記于學(xué)生的腦海中，也便于他們對(duì)本課程后續(xù)內(nèi)容的學(xué)習(xí)和提高學(xué)習(xí)的信心。其次，授課內(nèi)容的順序編排要便于學(xué)生與已掌握的有關(guān)知識(shí)相銜接。根據(jù)授課對(duì)象的實(shí)際情況，教學(xué)中按著細(xì)胞的組織結(jié)構(gòu)從外向內(nèi)，即：細(xì)胞表面→細(xì)胞質(zhì)→細(xì)胞核的順序，并將結(jié)構(gòu)或功能上聯(lián)系極為密切的細(xì)胞結(jié)構(gòu)的知識(shí)放在一起講授。以本課程的“細(xì)胞表面”與“細(xì)胞基質(zhì)和內(nèi)膜系統(tǒng)”兩章為例，對(duì)教材以及相關(guān)的教科書中的有關(guān)內(nèi)容做了較大的調(diào)整，重新編排與優(yōu)化。授課時(shí)“細(xì)胞表面”一章，首先介紹細(xì)胞表面的結(jié)構(gòu)組成（質(zhì)膜、細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞外被、細(xì)胞表面的特化結(jié)構(gòu)細(xì)胞連接），各結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)、功能以及這些結(jié)構(gòu)的相互關(guān)系；通過這樣的講授使學(xué)生清楚地知道多細(xì)胞生物中雖然所有的細(xì)胞都具有“質(zhì)膜”這樣一個(gè)界膜，它是細(xì)胞表面核心結(jié)構(gòu)，但多細(xì)胞生物不僅由細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞外還有細(xì)胞外基質(zhì)，同時(shí)沒有一個(gè)細(xì)胞是孤立的，細(xì)胞與細(xì)胞或與細(xì)胞外基質(zhì)形成特定的組織連接結(jié)構(gòu)，從而使多細(xì)胞生物成為一個(gè)和諧的統(tǒng)一體。之后再詳盡地介紹細(xì)胞表面核心結(jié)構(gòu)——質(zhì)膜的物質(zhì)的運(yùn)輸和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能，通過這部分的學(xué)習(xí)又使學(xué)生對(duì)膜的不對(duì)稱性和流動(dòng)性有了更好的理解。此外，由于核糖體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在功能上的關(guān)系極為密切，因此將核糖體并入內(nèi)膜系統(tǒng)中介紹，形成本課程的“細(xì)胞基質(zhì)和內(nèi)膜系統(tǒng)”一章。授課中首先講解非膜性細(xì)胞器——核糖體在細(xì)胞中的分布、化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)以及功能，之后介紹內(nèi)膜系統(tǒng)中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和溶酶體的超微結(jié)構(gòu)與功能，但內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的蛋白質(zhì)加工功能與蛋白質(zhì)的分揀形成本章獨(dú)立的一節(jié)，即“蛋白質(zhì)的分揀與加工”，內(nèi)容包含信號(hào)假說、蛋白質(zhì)的修飾與加工、蛋白質(zhì)的分揀和膜泡運(yùn)輸，此節(jié)為本章的教學(xué)重點(diǎn)之一。介紹信號(hào)假說時(shí)，由于有了核糖體的知識(shí)基礎(chǔ)，再結(jié)合具體的研究成果，學(xué)生則很容易理解分泌性蛋白的合成在細(xì)胞基質(zhì)中起始、肽鏈延伸暫停、向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移等信號(hào)假說的具體內(nèi)容；通過本節(jié)其他知識(shí)內(nèi)容的學(xué)習(xí)，清晰了蛋白質(zhì)的修飾加工可發(fā)生在肽鏈的合成以及運(yùn)輸過程中，因此構(gòu)成了蛋白質(zhì)合成、加工與運(yùn)輸?shù)耐暾w系。此外，將溶酶體的發(fā)生也獨(dú)立成節(jié)，放在“蛋白質(zhì)的加工與分揀”一節(jié)之后，以溶酶體酶的M6P分揀途徑為例，將信號(hào)假說、蛋白質(zhì)的加工與分揀以及膜泡運(yùn)輸?shù)牟糠謨?nèi)容串聯(lián)起來。通過上述講授內(nèi)容的遴選、調(diào)整與優(yōu)化，也使學(xué)生對(duì)結(jié)構(gòu)、功能、發(fā)生上相互關(guān)聯(lián)的內(nèi)膜系統(tǒng)的理解更加透徹。再次，根據(jù)教學(xué)時(shí)數(shù)適當(dāng)安排自學(xué)與課后討論的教學(xué)內(nèi)容，培養(yǎng)學(xué)生自主和探究學(xué)習(xí)的能力。如“細(xì)胞生物學(xué)的主要研究方法”一章，不可能在有限的學(xué)時(shí)內(nèi)將該部分內(nèi)容講透徹，因此該部分內(nèi)容以學(xué)生自學(xué)、課下參觀相關(guān)的儀器設(shè)備及與教師交流討論的形式實(shí)現(xiàn)學(xué)生對(duì)該部分知識(shí)的獲??；此外根據(jù)授課專業(yè)特點(diǎn)，葉綠體的知識(shí)也以學(xué)生自學(xué)和課下與老師交流的方式進(jìn)行。最后，注重講授內(nèi)容與其他課程內(nèi)容上既不過度重復(fù)又要較好地銜接。如在講授質(zhì)膜的功能——鈉鉀泵的知識(shí)時(shí)注意與《生理學(xué)》膜電位的知識(shí)相聯(lián)系、細(xì)胞骨架中微絲的功能時(shí)注重與《生理學(xué)》以及《組織胚胎學(xué)》肌肉收縮內(nèi)容的銜接，線粒體功能的講解則考慮與《生物化學(xué)》的內(nèi)容不過度重復(fù)和較好的銜接，而細(xì)胞核與染色體的知識(shí)需要考慮學(xué)生在《遺傳學(xué)》課程上已掌握的知識(shí)。由于本課程的開設(shè)在上述幾門課程之后，這就要求我們與上述課程的任課教師以及授課學(xué)生良好的溝通，適當(dāng)調(diào)整本課程的授課內(nèi)容與重點(diǎn)，從而使學(xué)生通過《細(xì)胞生物學(xué)》課程的學(xué)習(xí)，使他們知識(shí)體系更加系統(tǒng)化、深入化。 

由于細(xì)胞生物學(xué)的知識(shí)面廣、信息量大、發(fā)展快，因此教學(xué)內(nèi)容的改革是教學(xué)改革最重要的部分。結(jié)合我校水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)科的專業(yè)特點(diǎn)和授課對(duì)象的實(shí)際情況，對(duì)《細(xì)胞生物學(xué)》理論課的教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行遴選、調(diào)整重排與優(yōu)化，并且應(yīng)用于《細(xì)胞生物學(xué)》的教學(xué)中，提高了教學(xué)效果。此外，通過多年的教學(xué)實(shí)踐我們深深地體會(huì)到，完成好教學(xué)內(nèi)容，教師尤其要注重自身知識(shí)理論水平的提高，不斷地豐富教學(xué)內(nèi)容，才能不斷提高教學(xué)效果與教學(xué)質(zhì)量。 

參考文獻(xiàn)： 

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細(xì)胞生物學(xué)的任務(wù)范文第4篇

細(xì)胞生物學(xué)是以細(xì)胞為研究對(duì)象，從整體水平、亞顯微水平、分子水平三個(gè)層次，以動(dòng)態(tài)的觀點(diǎn)，研究細(xì)胞和細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能、細(xì)胞的生活史和各種生命活動(dòng)規(guī)律的學(xué)科。它作為生命科學(xué)的四大前沿學(xué)科之一，與分子生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和生態(tài)學(xué)并列[1]，是學(xué)習(xí)分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的基礎(chǔ)。隨著該學(xué)科新技術(shù)和新方法的建立，細(xì)胞生物學(xué)已成為各大高校醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)和生物學(xué)等專業(yè)的一門必修課[2]，反應(yīng)出細(xì)胞生物學(xué)在未來生命科學(xué)領(lǐng)域的重要性。自從我校生命科學(xué)院成立以來，細(xì)胞生物學(xué)就是生物科學(xué)、生物技術(shù)專業(yè)的學(xué)科基礎(chǔ)、必修課和主干課，是學(xué)生在我校的醫(yī)學(xué)大背景下理解疾病形成中的遺傳和分子生物學(xué)過程的基礎(chǔ)， 是理解包括分子靶向、干細(xì)胞療法等新穎的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)手段的基礎(chǔ)，其學(xué)科地位不可替代。 

二 細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中存在的問題 

 

隨著先進(jìn)生命科學(xué)“大數(shù)據(jù)”時(shí)代的到來，無論是基礎(chǔ)理論還是應(yīng)用技術(shù)研究，細(xì)胞生物學(xué)都處于生命科學(xué)最活躍的領(lǐng)域，知識(shí)更新快、內(nèi)容豐富且深?yuàn)W難懂。我院生物技術(shù)專業(yè)的本科學(xué)生多為專業(yè)調(diào)劑，初高中生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)欠扎實(shí)，學(xué)科興趣不足，學(xué)生自主學(xué)習(xí)的能力較弱。如果教學(xué)只按圖索驥照本宣科，根本無法調(diào)動(dòng)他們學(xué)習(xí)的積極性。另外，課本知識(shí)過于陳舊，無法適應(yīng)新時(shí)代學(xué)科發(fā)展的需要。盡管近些年部分教師已開始引導(dǎo)學(xué)生通過查閱文獻(xiàn)、綜述總結(jié)的方法接觸細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域最前沿的知識(shí)，但大多止步于盲目填鴨式羅列國外文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，沒有加以甄別和指導(dǎo)，學(xué)生很容易在復(fù)雜的信息和數(shù)據(jù)中喪失學(xué)習(xí)的信心。 

因此，如何使細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)緊跟學(xué)科發(fā)展的步伐，使學(xué)生在有限的學(xué)時(shí)中既能具備扎實(shí)的細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能，又使學(xué)生及時(shí)掌握最新的細(xì)胞生物學(xué)理論和應(yīng)用技術(shù)，能為他們將來的考研深造學(xué)習(xí)階段和日益劇烈的職場競爭中打下良好的基礎(chǔ)，這成為生物技術(shù)專業(yè)本科生細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中待解決的問題。僅靠教師講授為主的傳統(tǒng)教學(xué)方法和教學(xué)模式已不適應(yīng)目前學(xué)科的發(fā)展和人才培養(yǎng)的需求，難以提高教學(xué)質(zhì)量。 

三 以問題為導(dǎo)向的教學(xué)方法（ PBL）的優(yōu)勢 

 

1969年美國的神經(jīng)病學(xué)教授Barrows在加拿大的麥克馬斯特大學(xué)首創(chuàng)了一種以問題為導(dǎo)向的教學(xué)方法——PBL（Problem-Based learning）教學(xué)法[3]，它倡導(dǎo)讓學(xué)生通過自學(xué)、分析、討論和合作解決問題，從而培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)能力，發(fā)展學(xué)生綜合思考能力。這種以問題為基礎(chǔ)，以學(xué)生為主體，以教師為導(dǎo)向的啟發(fā)式教育，以培養(yǎng)學(xué)生的能力為教學(xué)目標(biāo)的教學(xué)方法與傳統(tǒng)的教學(xué)方法相比有諸多優(yōu)勢。 

1 突出學(xué)生的主體地位 

PBL教學(xué)法強(qiáng)調(diào)以學(xué)生的主動(dòng)學(xué)習(xí)為主，而不是傳統(tǒng)教學(xué)中的以教師講授為主;通過設(shè)計(jì)真實(shí)性任務(wù)，強(qiáng)調(diào)把學(xué)習(xí)融入到復(fù)雜的、有意義的問題情景中，通過學(xué)習(xí)者的自主探究和合作來解決問題，從而學(xué)習(xí)隱含在問題背后的科學(xué)知識(shí)，培養(yǎng)解決問題的技能和自主學(xué)習(xí)的能力[4，5]。 

2 提高學(xué)生對(duì)細(xì)胞生物學(xué)的學(xué)習(xí)興趣 

細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)內(nèi)容較多且大部分深?yuàn)W難懂，傳統(tǒng)教學(xué)模式主要通過教師制作豐富的多媒體課件將知識(shí)灌輸給學(xué)生，起初能夠激起學(xué)生興趣，但隨著知識(shí)的不斷深入，學(xué)生就會(huì)感覺枯燥無味，學(xué)習(xí)的積極性大大降低。而PBL教學(xué)可通過設(shè)計(jì)與日常生活息息相關(guān)的醫(yī)學(xué)實(shí)踐問題，使學(xué)生充分認(rèn)識(shí)自己的主人翁意識(shí)，主動(dòng)運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)知識(shí)解決這些問題。這種“提出問題——解決問題——歸納總結(jié)”的教學(xué)方法不但使學(xué)生鞏固了先前學(xué)過的知識(shí)，而且激發(fā)了他們主動(dòng)學(xué)習(xí)新知識(shí)的動(dòng)力。 

3 拓寬了學(xué)生的知識(shí)面 

PBL教學(xué)中，為了解決教師提出的問題，學(xué)生必須查閱相關(guān)文獻(xiàn)和收集材料。在這個(gè)過程中，學(xué)生不僅可以掌握本課程重點(diǎn)內(nèi)容，而且可以了解相關(guān)領(lǐng)域的熱點(diǎn)以及前沿進(jìn)展，拓寬了學(xué)生的知識(shí)面，有利于知識(shí)的理解和融會(huì)貫通。 

4 培養(yǎng)了學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí) 

PBL教學(xué)中需要小組成員分工查閱、收集和整理材料，一起合作討論、總結(jié)、制作多媒體課件，最后安排一人進(jìn)行陳述。通過此過程讓學(xué)生意識(shí)到團(tuán)隊(duì)協(xié)作的重要性，增強(qiáng)團(tuán)隊(duì)意識(shí)。經(jīng)過多輪合作還有利于各位成員挖掘自己的潛力、發(fā)揮各自特長、樹立自信。 

5 增強(qiáng)了教師自身素質(zhì) 

PBL教學(xué)過程中，教師雖然不再是主體，但導(dǎo)向作用不容忽視。首先在“提出問題”階段，教師要根據(jù)本堂課應(yīng)該教授的基本知識(shí)，結(jié)合該領(lǐng)域前沿?zé)狳c(diǎn)，設(shè)計(jì)出合理的案例，使學(xué)生通過解決此案例，既掌握了課本知識(shí)又了解了很多相關(guān)領(lǐng)域的前沿進(jìn)展;其次在學(xué)生“解決問題”階段，還需要盡可能回答學(xué)生提出的問題引導(dǎo)學(xué)生向正確的方向查閱資料;最后在“歸納總結(jié)”部分，教師還需要運(yùn)用豐富的知識(shí)對(duì)遺留問題進(jìn)行解釋，并對(duì)整個(gè)討論結(jié)果進(jìn)行總結(jié)。這就要求教師不僅熟練地掌握本學(xué)科及相關(guān)學(xué)科的知識(shí)，而且要深入廣泛了解相關(guān)領(lǐng)域前沿進(jìn)展，對(duì)知識(shí)具有融會(huì)貫通、靈活運(yùn)用的能力。在此過程中使得教師拓寬知識(shí)面，增加知識(shí)儲(chǔ)備，完善知識(shí)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)教與學(xué)的互動(dòng)，真正做到教學(xué)相長。 

四 PBL在生物技術(shù)專業(yè)本科生細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中的具體實(shí)施方法 

為了能夠在我院生物技術(shù)專業(yè)本科生細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)中順利開展PBL教學(xué)，并取得良好效果，在開課前，授課教師參加了2012年上海復(fù)旦大學(xué)舉辦的PBL教學(xué)培訓(xùn)，掌握了相關(guān)教學(xué)技能。在充分調(diào)查了我院生物技術(shù)專業(yè)本科生知識(shí)結(jié)構(gòu)及對(duì)細(xì)胞生物學(xué)知識(shí)的掌握情況后，我們制定了如下實(shí)施方案。 

1 實(shí)施對(duì)象 

浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院2011級(jí)生物技術(shù)專業(yè)1個(gè)班的學(xué)生。 

2 教學(xué)內(nèi)容的選擇 

我院生物技術(shù)專業(yè)屬于三本專業(yè)，學(xué)生又大多為專業(yè)調(diào)劑，初高中生物學(xué)基礎(chǔ)較弱。因此，在教學(xué)過程中，細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)部分如各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)和功能、細(xì)胞膜系統(tǒng)以及細(xì)胞骨架等可采用教師多媒體教授的傳統(tǒng)教學(xué)方法;而本學(xué)科的難點(diǎn)以及前沿問題，如細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的增殖與周期、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡與自噬、DNA的損傷與修復(fù)以及基因表達(dá)調(diào)控等則采用PBL教學(xué)，以問題為基礎(chǔ)，通過收集資料、論證、實(shí)施以及總結(jié)歸納，使學(xué)生切實(shí)感受到細(xì)胞生物學(xué)與人類日常生活間的聯(lián)系。進(jìn)而通過自主學(xué)習(xí)，提高學(xué)生自信心，更有利于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣?！?3 教師提出問題 

PBL教學(xué)中問題的設(shè)計(jì)非常重要，我們遵循以下原則： 第一，根據(jù)教學(xué)大綱的要求及章節(jié)重點(diǎn)內(nèi)容，結(jié)合目前細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)設(shè)計(jì)問題;第二，根據(jù)生物技術(shù)專業(yè)學(xué)生知識(shí)構(gòu)架，設(shè)計(jì)難易適中的問題;第三，設(shè)計(jì)結(jié)合日常生活中大家關(guān)注的生命科學(xué)問題。例如，細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)這一章圍繞G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)構(gòu)和功能這一知識(shí)點(diǎn)，設(shè)計(jì)了G蛋白偶聯(lián)受體突變與哪些疾病息息相關(guān)？與腫瘤相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有哪些，如何預(yù)防和治療？ 針對(duì)細(xì)胞分化這一章的干細(xì)胞這一重點(diǎn)知識(shí)，設(shè)計(jì)了干細(xì)胞的臨床應(yīng)用情況如何？干細(xì)胞與器官移植等問題。 

4 學(xué)生分組查閱資料 

問題提出以后，要分組解決問題。每組5人，分別設(shè)立組長負(fù)責(zé)本組問題的分工、督促查找資料和組織組內(nèi)討論等任務(wù)。提前一周將問題分發(fā)給學(xué)生，各小組經(jīng)過充分的調(diào)研和討論選取共同感興趣的問題。根據(jù)分工，各小組成員開展工作。同時(shí)要求教師配合每個(gè)小組，隨時(shí)與各小組進(jìn)行溝通和答疑。 

5 課堂討論 

各小組根據(jù)分工將材料做成PPT，由組長進(jìn)行10分鐘陳述，組員補(bǔ)充，其他組進(jìn)行質(zhì)疑和指正。若交流中出現(xiàn)學(xué)生解決不了的問題，教師適當(dāng)進(jìn)行啟發(fā)和引導(dǎo)，如果問題仍解決不了，則由教師解答。 

6 總結(jié)歸納以及教師評(píng)價(jià) 

課堂討論結(jié)束后，首先，學(xué)生對(duì)本組存在的問題進(jìn)行歸納總結(jié)，自我評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)過程和學(xué)習(xí)結(jié)果，思考知識(shí)、技能、小組成員協(xié)作和認(rèn)知策略各方面的收獲。其次，教師應(yīng)對(duì)各小組信息是否完整與前沿、是否有創(chuàng)新與團(tuán)隊(duì)合作性、整理資料是否有邏輯性與條理性、是否按時(shí)完成、小組成員在小組討論時(shí)的參與積極性以及各組的匯報(bào)是否精彩等方面進(jìn)行評(píng)價(jià)。同時(shí)對(duì)于表現(xiàn)優(yōu)異的小組給予適當(dāng)獎(jiǎng)勵(lì)，進(jìn)一步提高學(xué)生的參與積極性。 

總之，為了提高教學(xué)質(zhì)量，培養(yǎng)和提高我校生物技術(shù)專業(yè)學(xué)生的實(shí)踐創(chuàng)新能力，促進(jìn)學(xué)生綜合素質(zhì)的提高，我們積極進(jìn)行教學(xué)改革。在結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)課程特點(diǎn)和生物技術(shù)專業(yè)學(xué)生實(shí)際情況下，我們將PBL 教學(xué)模式引入課堂，并且獲得了較好的教學(xué)效果。我們希望通過PBL教學(xué)模式的實(shí)施，能夠充分激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣及積極性，培養(yǎng)出具有良好學(xué)習(xí)能力、實(shí)踐能力及創(chuàng)新能力的高素質(zhì)人才。 

參考文獻(xiàn) 

[1]翟中和，等. 細(xì)胞生物學(xué)[M].北京：高等教育出版社， 2000. 

[2]余曉麗等. 細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)改革與實(shí)踐[J]. 南陽師范學(xué)院學(xué)報(bào)， 2006，5（6）. 

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[4]Mancy LJ，Ann MP，Ann L，et al.Developing a problem- 

細(xì)胞生物學(xué)的任務(wù)范文第5篇

研究性學(xué)習(xí) 細(xì)胞生物學(xué) 實(shí)踐教學(xué)

教學(xué)模式不是固定不變的公式。任何教師組織研究性學(xué)習(xí)都不能機(jī)械地套用它；同時(shí)，任何學(xué)生都沒有一成不變的學(xué)習(xí)方式。細(xì)胞生物學(xué)作為一門理論性與實(shí)踐性較強(qiáng)的學(xué)科，其方法與技術(shù)已經(jīng)滲透到現(xiàn)代生命科學(xué)的各個(gè)分支領(lǐng)域。面向21世紀(jì)，為了躋身世界先進(jìn)行列，為了完成我國高等教育“培養(yǎng)具有創(chuàng)新精神和實(shí)踐能力的專門人才”的光榮任務(wù)，深化高等教育改革勢在必行。深化高等教育改革的關(guān)鍵在于探索以培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力為重點(diǎn)的新型教學(xué)模式。為了能在有限的課時(shí)內(nèi)，讓學(xué)生在理論與實(shí)驗(yàn)技能方面有一個(gè)全面的提升，筆者將研究性學(xué)習(xí)模式引入細(xì)胞生物學(xué)實(shí)踐教學(xué)。

一、中國高校實(shí)踐教學(xué)的困境

過去很長一段時(shí)間，實(shí)踐教學(xué)由于受到主、客觀因素的束縛，從總體上說不很令人滿意。主要表現(xiàn)在門類眾多、內(nèi)容單一、重復(fù)嚴(yán)重、學(xué)時(shí)不夠、方式呆板、考核不力等諸多方面。

1.課時(shí)減少，內(nèi)容滯后。實(shí)踐教學(xué)課時(shí)減少，是近幾年新教學(xué)計(jì)劃的特點(diǎn)之一。課時(shí)的減少與加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)課、擴(kuò)充實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的普遍趨勢形成尖銳的矛盾。由于學(xué)科的高速發(fā)展，使得實(shí)踐教學(xué)滿足不了與理論接軌，往往實(shí)驗(yàn)內(nèi)容滯后于理論發(fā)展，存在著很多缺陷。而隨著教學(xué)形勢和任務(wù)的改變，這些弊端顯得更加突出，影響了該學(xué)科教學(xué)質(zhì)量的提高。

2.教學(xué)方法單一陳舊。不少教師觀念保守，滿足于完成既定教學(xué)任務(wù)，只教書，不育人。集中表現(xiàn)在因循知識(shí)的“注入”而不重視思維的啟迪；固守教師在課堂上信息的單向傳遞，而不重視學(xué)生的主動(dòng)參與；局限于基本教材的知識(shí)面而不重視引導(dǎo)學(xué)生涉獵更廣泛的知識(shí)領(lǐng)域?！白寣W(xué)生成為學(xué)習(xí)的主體”、“讓學(xué)生學(xué)會(huì)學(xué)習(xí)”還未能得到落實(shí)。因而，我國大學(xué)生的獨(dú)立性、批判性、創(chuàng)造性、應(yīng)用性等能力與國外大學(xué)生相比顯得較差。

3.考核方法片面。一般是根據(jù)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)報(bào)告來直接打分，但是這樣做的弊端是教師的主觀性較大，同時(shí)對(duì)學(xué)生實(shí)際的實(shí)驗(yàn)操作掌握水平很難有一個(gè)正確的評(píng)價(jià)，較難客觀的反映實(shí)踐教學(xué)的效果。

二、研究性學(xué)習(xí)模式引入細(xì)胞生物學(xué)實(shí)踐教學(xué)

1.統(tǒng)籌課程安排，改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方案。不開設(shè)驗(yàn)證性的實(shí)驗(yàn)，只開綜合性、系統(tǒng)性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)，將學(xué)術(shù)研究比較成熟的研究結(jié)果改造成符合實(shí)驗(yàn)教學(xué)要求和特點(diǎn)的綜合性實(shí)驗(yàn)。系統(tǒng)教授完理論課程后，利用集中的幾周時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)，使理論課和實(shí)驗(yàn)課有一個(gè)有效的銜接，使學(xué)生能夠系統(tǒng)掌握細(xì)胞生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)技能。

2.自編實(shí)驗(yàn)教材，重新設(shè)置內(nèi)容。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中，根據(jù)精選的教學(xué)內(nèi)容，編寫了《生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書；在教學(xué)過程中，以自編教材為主，并參考其他輔助教材。教師只講解基本的操作方法和技術(shù)，既不是嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)順序，也不是標(biāo)準(zhǔn)的操作程序，學(xué)生可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)方案參考使用。

為學(xué)生創(chuàng)設(shè)實(shí)際情境，以便提出高質(zhì)量問題，并以“課題研究”作為載體，激勵(lì)學(xué)生尋找問題的答案。這些問題應(yīng)該是：

（1）新的，即呈現(xiàn)的是不熟悉的情境；（2）在學(xué)生的能力范疇之內(nèi)，即在先前學(xué)會(huì)的知識(shí)和技能的范圍之內(nèi)時(shí)。學(xué)生自主組隊(duì)，根據(jù)提出的問題，選用合適的實(shí)驗(yàn)方法，解決問題。

3.全面開放實(shí)驗(yàn)室，以科研帶動(dòng)教學(xué)。實(shí)驗(yàn)室開放是實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式、手段的革新，我們要樹立教學(xué)與科研相結(jié)合的思想，“以科研促教學(xué)，以教學(xué)帶科研”，在教學(xué)中研究，在研究中教學(xué)。實(shí)驗(yàn)室的開放包含兩個(gè)方面：實(shí)驗(yàn)設(shè)備資源的開放和教學(xué)方式的開放。實(shí)驗(yàn)設(shè)備資源的開放，即學(xué)生可以合理選擇、使用適合的實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備，完成實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。教學(xué)方式的開放，也就是教與學(xué)的開放。主要表現(xiàn)在學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、實(shí)驗(yàn)方法等的選擇，實(shí)驗(yàn)運(yùn)行的環(huán)節(jié)，完成實(shí)驗(yàn)的形式，以及指導(dǎo)教師指導(dǎo)方法的開放，強(qiáng)調(diào)學(xué)生的主體地位。

4.利用網(wǎng)絡(luò)，實(shí)時(shí)指導(dǎo)。由于現(xiàn)代教學(xué)手段的廣泛應(yīng)用，基于校園網(wǎng)的Black Board網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)已經(jīng)成為傳統(tǒng)教室的延伸。教師和學(xué)生可以通過網(wǎng)絡(luò)隨時(shí)進(jìn)行交流和答疑。充分利用計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)實(shí)驗(yàn)軟件和多媒體教學(xué)課件。網(wǎng)絡(luò)的充分利用可以實(shí)現(xiàn)教師與學(xué)生之間的實(shí)時(shí)互動(dòng)，大大提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效率。這種教學(xué)方式不受時(shí)間和空間的限制，充分利用了師生的空閑時(shí)間。

5.建立合理的考核機(jī)制。實(shí)踐教學(xué)的效果不應(yīng)該由原有單一的考試或?qū)嶒?yàn)報(bào)告成績老考核。我們的教學(xué)目標(biāo)直接指向?qū)W生多方面的發(fā)展變化，因此評(píng)價(jià)的指標(biāo)也應(yīng)該以學(xué)生多方面的發(fā)展變化為依據(jù)。以現(xiàn)代的教學(xué)質(zhì)量觀來指導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)效果的評(píng)價(jià)，必須以是否有利于學(xué)生的進(jìn)步與發(fā)展作為考核指標(biāo)。如可由實(shí)驗(yàn)態(tài)度（10%）、基本理論（15%）、操作技能（50%）、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（25%）綜合評(píng)定產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)考核以學(xué)生實(shí)際操作技能和分析解決問題的能力為主。

三、結(jié)束語

總之，在當(dāng)前高校課程實(shí)踐教學(xué)中，改革的目的是改變傳統(tǒng)教學(xué)中的一些不合理的教學(xué)方法和手段，提高教學(xué)質(zhì)量，激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新思維，促進(jìn)學(xué)生學(xué)習(xí)的自覺性和主動(dòng)性，使培養(yǎng)的學(xué)生更能適應(yīng)現(xiàn)代社會(huì)發(fā)展對(duì)生物類專業(yè)專門人才的需求。

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是一門重要的實(shí)驗(yàn)課程，把握好理論課程和實(shí)驗(yàn)課程的有效銜接，才能真正提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量和效果。在本科生中開設(shè)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)這樣的綜合性實(shí)驗(yàn)課的改革是一個(gè)系統(tǒng)工程，除了在教學(xué)實(shí)踐中不斷改進(jìn)教學(xué)方法外，我們教師自身也要為人師表，不斷提高自己，以科研工作充分帶動(dòng)教學(xué)，應(yīng)在教學(xué)過程中對(duì)應(yīng)學(xué)生自身的特點(diǎn)，根據(jù)自己的學(xué)科特點(diǎn)和學(xué)生未來發(fā)展的不同要求對(duì)他們進(jìn)行因材施教，培養(yǎng)更多高素質(zhì)的人才。

參考文獻(xiàn)：

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