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法制觀念心得體會范文第1篇

【摘要】 目的 觀察納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對鼻黏膜纖毛的毒性。方法 以生理鹽水和鹽酸麻黃堿為陰性對照，采用離體法觀察納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對蛙上腭黏膜纖毛維持自身擺動的持續(xù)時間，采用在體法及電鏡技術觀察納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對大鼠鼻黏膜的局部毒性。結果 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對蛙上腭黏膜纖毛的活性影響較低，對大鼠鼻黏膜毒性較小。結論 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對黏膜無明顯毒性作用。

【關鍵詞】 納米；辛夷；鼻黏膜；蛙上腭黏膜；過敏性鼻炎

Influence of Magnolia Biondii Pamp Volotile Oil Nanometer Bangosome on Nasal Membrane and Ciliary LU Wei-wei， WU Min， Xi Zheng-jun， et al　Xinhua Hospital， Medical College of Shanghai Jiaotong University， Shanghai 200092， China

Abstract：Objective To investigate the toxicity of nasal membreane and ciliary of the Magnolia biondii Pamp volotile oil nanometer bangosome. Methods Toad palate and rat nasal membrane were used as experimental material， physiological saline and hydrochloride ephedrine as negative control. The Magnolia biondii Pamp volotile oil nanometer bangosome on ciliary movement were carried out using in vitro and electron microscope technique. Results The Magnolia biondii Pamp volotile oil nanometer bangosome had little cilitoxicity to toad palate and rat nasal membrane. Conclusion The Magnolia biondii Pamp volotile oil nanometer bangosome had little cilitoxicity to membrane.

Key words：nanometer bangosome；Magnolia biondii Pamp；nasal membrane；toad palate；allergic rhinitis

過敏性鼻炎是臨床常見病，以鼻癢、噴嚏、鼻分泌亢進、鼻黏膜腫脹為主要特點，常伴發(fā)哮喘、鼻竇炎和分泌性中耳炎等上、下氣道疾病，影響患者生活質(zhì)量，增加經(jīng)濟負擔。滴鼻劑、噴霧劑在治療中起著重要的作用，但有些藥物在鼻腔局部給藥后，會影響鼻腔黏膜纖毛系統(tǒng)的功能[1]。辛夷具有散風寒、通鼻竅之功，主要有效成分是揮發(fā)油。本課題組在前期研究中采用納米技術成功的制備了包含辛夷揮發(fā)油的納米脂質(zhì)體，通過動物實驗證實納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體有抗炎、抗過敏作用。本實驗進一步探討其對蛙口腔黏膜纖毛活動的影響及對大鼠鼻黏膜毒性作用。現(xiàn)報道如下。

1 實驗材料

1.1 動物及分組

蛙48只，體重30～40 g，雌雄不拘，上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院動物中心提供，使用許可證號：SYXK(滬)2003-0031。隨機分為6組(每組8只)：氯化鈉溶液組、1%鹽酸麻黃堿組、辛夷揮發(fā)油(相當于原藥材55.6 g/mL)組、大劑量納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體(5.01 mg/mL)組、小劑量納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體(2.505 mg/mL)組、酮替酚組。清潔級SD大鼠16只，6～8周齡， 250 g左右，雄性，隨機分為對照組、實驗組，每組8只。1.2 儀器和試劑

光學顯微鏡(OLYMPUS BX51TF，Japan)，電鏡(飛利浦CM- 120)，眼科剪，止血鉗，注射器，蛙板，生理鹽水，1%鹽酸麻黃堿，辛夷花(上海華清中藥飲片公司，批號2004102802)，納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體(自制，5.01 mg/mL)，酮替酚滴鼻液(山東魯杭辰欣藥業(yè)有限公司，批號0506271)等。

2 實驗方法

2.1 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對蛙上腭黏膜纖毛活性的影響[2-3]

將蛙仰臥固定在蛙板上，牽開蛙口，用眼科剪分離并剪下3 mm×3 mm上腭黏膜，用0.9%氯化鈉溶液洗凈表面的血液和粘液，黏膜面向上平鋪于載玻片上，于黏膜表面滴0.2 mL實驗藥液，輕輕蓋上蓋玻片，在室溫下置40倍光學顯微鏡下觀察并記錄從點藥開始至纖毛停止搖動所經(jīng)過的時間。在此期間要不斷從蓋玻片與載玻片的縫隙中滴加藥液，使纖毛始終浸泡在藥液中，總量不超過0.5 mL。計算各組纖毛自身擺動時間的均值和標準差，并做組間比較。

2.2 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對大鼠鼻黏膜毒性試驗

滴鼻給藥，每日3次，共15 d。給藥劑量：實驗組用納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體(5.01 mg/mL)滴鼻3次，每次0.2 mL；對照組用氯化鈉溶液滴鼻3次，每次0.2 mL。第15天實驗結束，取1 mm3鼻中隔黏膜置于4%戊二醛緩沖液及鋨酸進行固定、脫水、包埋，超薄切片及電子染色后，電鏡觀察。

2.3 觀察指標

2.3.1 蛙上腭黏膜纖毛自身擺動時間

計算各組纖毛自身擺動時間的均值和標準差，并做組間比較。

2.3.2 電鏡觀察大鼠鼻黏膜

取1 mm3鼻中隔黏膜置于4%戊二醛緩沖液及鋨酸中進行固定、脫水、包埋，超薄切片及電子染色后，電鏡觀察。

2.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。對各組均數(shù)做組間t檢驗。

3 結果

3.1 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對蛙上腭黏膜纖毛活性的影響

(見表1)表1 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對蛙上腭纖毛運動的影響

(略)注：與生理鹽水組比較，＊P

3.2 納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對大鼠鼻黏膜毒性實驗

納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對大鼠鼻黏膜毒性實驗的結果見圖1。從圖1可以看出，對照組給予生理鹽水15 d后，電鏡下可見纖毛細胞結構良好，胞質(zhì)內(nèi)線粒體等結構正常，細胞間連接良好。實驗組給予納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體15 d后，電鏡下可見超微結構與對照組基本相似，纖毛內(nèi)部結構基本正常，細胞間連接結構存在。在上皮區(qū)域可見較多散在杯狀細胞，在上皮細胞表面可見排列密集一致的纖毛。

轉(zhuǎn)貼于 　　4 討論

辛夷用于鼻炎的治療[4-5]臨床療效確切，其主要成分為揮發(fā)油，具有廣泛的藥理活性，治療的靶點較多，它可以通過抗組胺、抗過敏、抗炎和對肥大細胞的保護作用等多個環(huán)節(jié)發(fā)生影響。但由于其易揮發(fā)、吸收少、有一定刺激性、藥物作用的靶向性不明了而限制了其在臨床上的推廣應用和療效的發(fā)揮。納米脂質(zhì)體具有高效、低毒、可生物降解、生物膜通透性高的特點[6]，成為中藥納米化最理想的載體材料之一。

本課題組發(fā)揮中醫(yī)特色，多年來對中藥辛夷做了充分的研究[7-8]，在納米砂仁揮發(fā)油脂質(zhì)體[9]研制的基礎上，進一步研制出了納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體，以期達到增強療效、增進穩(wěn)定性、減少鼻黏膜刺激性等目的。通過動物實驗證實了納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體有抗炎、抗過敏作用。本實驗進一步探討其對蛙口腔黏膜纖毛活動的影響及對大鼠鼻黏膜毒性作用。

鼻腔作為藥物的給藥部位日益受到關注，鼻腔給藥后可獲得滿意的生物利用度，但必須注意對鼻纖毛的毒性作用。鼻腔黏膜表面覆蓋著一層柱狀纖毛，正常情況下，纖毛協(xié)調(diào)一致擺動，可以清除進入鼻腔的異物，起到保護作用。鼻腔給藥后，纖毛運動受到不同程度的影響，從而影響鼻腔正常生理功能。藥物對鼻黏膜的毒性主要表現(xiàn)為對黏膜纖毛的毒性，首先是對纖毛擺動的影響。而纖毛的毒性大小，受藥物本身及其濃度大小、藥物的滲透壓、pH值等很多因素的影響。評價藥物或輔料對鼻黏膜纖毛毒性的方法有在體動物模型試驗法和離體動物模型試驗法，選用動物模型主要有雞胚胎氣管黏膜纖毛、大鼠鼻黏膜纖毛和蛙或蟾蜍上腭黏膜纖毛，均與哺乳動物鼻黏膜纖毛相似。大鼠鼻黏膜和蛙或蟾蜍上腭黏膜模型法材料易得，操作簡便，故應用較廣。

本實驗以生理鹽水和鹽酸麻黃堿為陰性對照，采用蛙上腭黏膜及大鼠鼻黏膜，考察納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對黏膜纖毛毒性。結果顯示，生理鹽水、1%鹽酸麻黃堿、酮替酚及小劑量納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對纖毛擺動的抑制作用低于大劑量納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體，但大劑量納米辛夷揮發(fā)油脂質(zhì)體對纖毛擺動的抑制作用明顯低于辛夷揮發(fā)油(P

【參考文獻】

1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.中國醫(yī)院制劑規(guī)范[M].第2版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995.162.

[2] 蔣新國，霍景斌，方曉玲，等.藥物的鼻黏膜纖毛毒性及評價方法[J].藥學學報，1995，30：848.

[3] Meun SG， Verhoef JC， Marttin E， et al. The effect of nasal drug formulation on ciliary beating in vitro[J].Int J Pharm， 1996，135：137－145.

[4] 李小莉，張永忠.辛夷揮發(fā)油的抗過敏實驗研究[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2002，22(9)：520－520.

[5] 王文魁，張 映，沈映君，等.辛夷油的藥效學實驗研究[J].中國獸藥雜志，2000，34(4)：23－23.

[6] Lieb LM， Ramachandran C， Weiner N， et al. Follicular (pilosebaccous unit) deposition and pharmacological behavior of cimetidine as a function of formulation[J].Pharm Res，1994，11：419－423.

[7] 吳 敏，倪健俐，李 戰(zhàn).辛蒼合劑對哮喘小鼠白細胞介素4、5的影響[J].上海中醫(yī)藥大學學報，2004，18(1)：54－55.