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      DNA/粘土界面反應特征探究

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      DNA/粘土界面反應特征探究

      本文作者:吳平霄唐旖旎作者單位:華南理工大學

      HTDM-MMT的NaOAc解吸率為41.1%,F(xiàn)e/Al-MMT的NaH2PO4的解吸率占總解吸率的50%。解吸結果表明,經(jīng)有機HTDMA改性后,dna的吸附主要通過靜電引力作用。DNA分子中磷酸基團通過配位交換、氫鍵和靜電引力的作用吸附于無機Fe/Al-MMT和SDS-MMT內(nèi)外表面。蒙脫石表面聚羥基Fe/Al和SDS存在顯著增強了DNA的吸附強度。實驗結果表明,結構、電負性及表面性質(zhì)是影響不同改性蒙脫石吸附DNA分子的關鍵因素。

      DNA與陰離子粘土除吸附作用外,主要是層間插層反應。XRD和FTIR結果顯示,LDH層間距由原始0.76nm擴大到2.3nm,DNA的紅外特征峰在復合中均出現(xiàn)DNA-LDH復合體上出現(xiàn)了DNA分子中骨架和堿基上的C=O(1534cm-1和1488cm-1),C–O伸縮振動峰(1228cm-1),P–O對稱伸縮振動(1096cm-1),說明DNA已通過離子交換插入LDH的層間。然而DNA分子并沒有完全交換出LDH層中NO3-(DNA部分嵌入),未交換到層間的DNA分子通過吸附作用固定于LDH表面上。帶負電的DNA長鏈通過離子交換法插入到LDH層板中,由DNA直徑和晶胞參數(shù)計算得出,插入的DNA分子每個負電荷需要3.4nm2的面積,而LDH單位電荷等效面積僅為2.49nm2,因而插入部分DNA長鏈在LDH層間受到層板擠壓而彎曲。同時,溶液中離子化的DNA分子并沒有完全交換出LDH層中NO3-,而是部分長鏈的插層,并對結構產(chǎn)生了一定的影響。其結構的影響表現(xiàn)在,大量絲狀DNA圍繞在LDH片層周圍,而部分DNA長鏈進入LDH層間,使六邊形結構發(fā)生一定變形。彎曲的長鏈的電荷分布是插入有限的層間的控制關鍵。在80℃,pH=7.3條件下,DNA分子會發(fā)生部分離子化,DNA堿基中的氨基基團脫去質(zhì)子,使DNA分子帶負電荷,DNA長鏈進入到LDH層間且在其表面也有一定吸附。

      此外,在DNA與陰離子粘土作用研究中,成功地制備了DNA-LDH納米復合體,探討在重金屬Cd2+、Pb2+作用下,LDH對DNA的保護機制,以期為LDH在基因載體材料上的應用提供理論依據(jù)。研究表明,層間彎曲的DNA分子受到層板保護而不受Cd2+、Pb2+影響,而表面的DNA分子是由于溶液中的Cd2+、Pb2+被固定而受到的保護。

      用循環(huán)伏安法測定的Cd2+、Pb2+與DNA及DNA-LDH復合體反應的循環(huán)伏安曲線如圖3所示,DNA溶液中也有兩個明顯的不可逆的還原峰,這是DNA堿基的電化學還原峰。加入Cd2+溶液200μg/mL后,發(fā)現(xiàn)只有一個還原峰,峰電流明顯下降。說明加入Cd2+后,Cd2+與DNA形成了一種電惰性化合物,致使陰極峰電流下降。加入Pb2+溶液200μg/mL后,由于其對腺嘌呤A和胞嘧啶C的還原,在陰極上會產(chǎn)生一個明顯的凹陷。而DNA-LDH復合體中的DNA還原峰與原始DNA保持一致,兩個還原峰出現(xiàn)在EP=-1.2mV和EP=-2.4mV位置,也沒有產(chǎn)生陰極凹陷。這表明當DNA固定在LDH上時,Cd2+、Pb2+就不能插入DNA溝槽之中,與堿基或其它基團的發(fā)生締合作用。研究結果表明,一方面,LDH吸附溶液中的Cd2+、Pb2+于外表面上從而固定Cd2+、Pb2+,另一方面,LDH層板為DNA提供了保護空間,阻止Cd2+、Pb2+進入層間域與DNA作用從而保護DNA分子。

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