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      筍殼魚研究論文:筍殼魚精子結(jié)構(gòu)探究

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      筍殼魚研究論文:筍殼魚精子結(jié)構(gòu)探究

      本文作者:胡亞麗劉洋朱曉平尹紹武祝斐作者單位:南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院

      結(jié)果

      1掃描電鏡下精子形態(tài)

      在掃描電鏡下可見精子由頭部和尾部(鞭毛)兩部分構(gòu)成(圖版Ⅰ-1),即圓形的頭頸部和細(xì)而長的尾部。頸部很短不明顯,在圓形頭部的后面緊接著是由圓形的線粒體圍成的一圈(圖版Ⅰ-2),尾部自頭部后端的正中部向后延伸,纖細(xì)且長。頭部直徑1.98~12μm,尾部鞭毛長222~392μm。頭部外側(cè)表面凹凸不平,呈波浪狀。

      2透射電鏡下精子形態(tài)

      在透射電鏡下可見精子由頭部、中段和尾部三部分組成。頭部細(xì)胞核呈扁卵圓形(圖版Ⅱ-1,3),細(xì)胞核的后端正中部有一凹陷入核內(nèi)的較淺的植入窩。核膜與質(zhì)膜間存在間隙,其間分布有細(xì)胞質(zhì)、囊泡、溶酶體。在細(xì)胞核后端,核膜與質(zhì)膜間除細(xì)胞質(zhì)外,還分布有5~7個呈環(huán)形單層排列的線粒體(圖版Ⅱ-3,4,5,6)。中段較短且不太明顯,其主要結(jié)構(gòu)是中心粒復(fù)合體和袖套(sleeve)。尾部細(xì)長,軸絲具有典型的“9+2”型結(jié)構(gòu),鞭毛從頭部后端凹陷的植入窩伸出(圖版Ⅱ-2,4,5)。

      1)精子頭部

      云斑尖塘鱧精子頭部的橫切面接近圓形,細(xì)胞核前方無頂體(acrosome)(圖版Ⅱ-1,2)。核膜與質(zhì)膜間有小間隙,內(nèi)有細(xì)胞質(zhì)、囊泡、溶酶體。細(xì)胞質(zhì)膜表面不平整,呈凹凸不平狀。細(xì)胞核呈扁卵圓形,核內(nèi)的染色質(zhì)致密,呈顆粒狀或短棒狀。染色質(zhì)中可見數(shù)量很少的空隙(即核泡),空隙中有少量電子致密物質(zhì)(圖版Ⅱ-3,7)。細(xì)胞核后方正中有一較淺植入窩(圖版Ⅱ-4)。

      2)精子中段

      云斑尖塘鱧精子中段不太明顯,只見到頭部后端呈單層環(huán)狀排列的一圈圓形線粒體(圖版Ⅱ-4)。中心粒復(fù)合體包括近端中心粒和遠(yuǎn)端中心粒(也稱基體)。近端中心粒長軸與遠(yuǎn)端中心粒垂直,呈“T”字型(圖版Ⅱ-2,5,6)。袖套緊接于細(xì)胞核的后端,呈圓筒狀,兩邊對稱,袖套腔較窄且淺。分為袖套內(nèi)膜和袖套外膜。袖套中含有線粒體5~7個,呈單層環(huán)狀排列,線粒體內(nèi)可見清晰的線粒體嵴。線粒體間觀察到少量囊泡,內(nèi)含一些電子致密物質(zhì)(圖版Ⅱ-4,6)。在袖套的縱切面可見2~3個圓形線粒體(圖版Ⅱ-3,4,5),橫切面有5~7個線粒體(圖版Ⅱ-6)。

      3)精子尾部

      云斑尖塘鱧精子的尾部較細(xì)長,起始于植入窩。尾部(鞭毛)的中央結(jié)構(gòu)是軸絲,軸絲具有典型的“9+2”型雙聯(lián)管結(jié)構(gòu)(圖版Ⅱ-4,5,8),在尾部鞭毛橫切面上,“9+2”型雙聯(lián)管結(jié)構(gòu)及管腔非常清晰。外周是9組二聯(lián)微管,中央是一組微管對。軸絲的外方有發(fā)達(dá)的側(cè)鰭。側(cè)鰭基部有囊泡(圖版Ⅱ-8)。因發(fā)達(dá)的側(cè)鰭呈波紋狀,所以在鞭毛縱切面上看不到完整的側(cè)鰭,只見到不規(guī)則曲線狀(圖版Ⅱ-9)。

      討論

      云斑尖塘鱧的成熟精子未見頂體。其精子的頭部和中段連接較為緊密。在掃描電鏡下很難將頭部和中段區(qū)分開來,只見到圓形的頭頸部和細(xì)長的尾部。在透射電鏡下,可明顯地觀察到頭部、中段和尾部三個部分。這和大多數(shù)硬骨魚類精子的結(jié)構(gòu)相同[8]。

      1細(xì)胞核

      掃描電鏡下可見云斑尖塘鱧精子圓形頭部和細(xì)長尾部。頸部很短不明顯,只在圓形頭部后面緊接著的圓形線粒體圍成的一圈。掃描電鏡下黃顙魚[9]的精子頭部呈近圓球形且分為頭部和鞭毛兩部分,頭部直徑(1.53~1.78μm)比云斑尖塘鱧精子頭部直徑(1.98~12μm)略小些。而在透射電鏡下云斑尖塘鱧精子頭部呈扁卵圓形,和大多數(shù)體外受精硬骨魚類的精子頭部相近。草魚和興國紅鯉[10]的精子頭部呈圓形或橢圓形,烏蘇里擬鲿[11]精子的頭部呈球形或橢圓球形,而江黃顙魚[12]精子的頭部則呈馬鞍形。云斑尖塘鱧精子頭部細(xì)胞核的植入窩較淺,約為精子頭部的1/5左右。鯉魚[13]、草魚[10]、興國紅鯉[10]精子也有一較淺的植入窩;而黃顙魚[14]、長吻[15]的植入窩都非常發(fā)達(dá),黃顙魚的植入窩呈井狀;長吻的植入窩極深,凹入深度約為精子頭部長徑的5/6。云斑尖塘鱧精子質(zhì)膜與核膜之間的小空隙間有細(xì)胞質(zhì)、線粒體、溶酶體和少量囊泡。這與已報道的斜帶石斑魚[16]、褐牙鲆[7]等精子類似,但不同于鯉[13]、草魚和興國紅鯉[10]核膜和質(zhì)膜之間緊貼。云斑尖塘鱧精子頭部核質(zhì)膜間空間的大小及細(xì)胞質(zhì)的多少有何生理意義尚待進(jìn)一步研究。推測、這可能與本實(shí)驗(yàn)所使用的精子是通過人工催產(chǎn)獲得有關(guān)。云斑尖塘鱧精子中囊泡、溶酶體等結(jié)構(gòu)的存在,可能是因?yàn)榫蛹?xì)胞成形后,某些代謝活動仍在繼續(xù),其殘留物需要通過核孔轉(zhuǎn)移出細(xì)胞核,而囊泡、溶酶體等結(jié)構(gòu)在這一系列代謝活動中需發(fā)揮作用。云斑尖塘鱧部分精子濃縮的細(xì)胞核中存在空隙,這種空隙在多種魚類精子中都有發(fā)現(xiàn),如黃鰭東方鲀[17]、紅鰭東方魨[18]、鯉魚[13]、黃顙魚[14]、斜帶石斑魚[16]等,此結(jié)構(gòu)被多數(shù)人稱作核泡。Poirier等[19]認(rèn)為核泡是由于核質(zhì)部分高度凝聚的結(jié)果,趙會宏等[16]則認(rèn)為這種結(jié)構(gòu)并非核泡,只是濃縮染色質(zhì)中的間隙,因其周圍沒有膜的存在。本研究也沒有在間隙周圍觀察到膜結(jié)構(gòu),因此認(rèn)為這種結(jié)構(gòu)并非核泡,與趙會宏等的觀點(diǎn)一致。劉利平等[12]對江黃顙魚的研究指出,核空泡隨著精子的成熟數(shù)量逐漸減少。本研究所用的是人工催熟的云斑尖塘鱧精子,核空泡的存在很可能與精子的成熟程度有關(guān)。

      2中心粒復(fù)合體

      云斑尖塘鱧精子的中心粒復(fù)合體由近端和遠(yuǎn)端中心粒組成。和多數(shù)硬骨魚類精子一樣,其精子的近端和遠(yuǎn)端中心?;ハ啻怪保省癟”形。平鯛[20]精子的中心粒復(fù)合體也呈“T”形;而斜帶石斑魚精子中心粒復(fù)合體偏向核的一側(cè),呈“〉”形;黃顙魚[14]精子中心粒復(fù)合體有中心粒間體存在,近端中心粒和基體首尾相對,呈“一”字形;鯉魚[13]的則呈倒“L”形;長吻[15]精子的縱切面上,近端中心粒外被環(huán)狀的中心粒帽包裹,中心粒帽與細(xì)胞核之間有微絲相連,近端中心粒后為基體;斑點(diǎn)叉尾[7]精子中心粒復(fù)合體是由兩個基體組成;體內(nèi)受精的褐菖鲉[21]的精子中心粒復(fù)合體僅由基體和基體帽組成。

      3袖套

      大多數(shù)硬骨魚類的袖套中線粒體為4個,云斑尖塘鱧精子的袖套中有線粒體5~7個,在掃描電鏡下明顯可見圓形線粒體單層排列成呈環(huán)狀。在透射電鏡下袖套縱切面可見2~3個圓形線粒體,橫切面有6~7個線粒體。長吻[15]、斑點(diǎn)叉尾[7]等魚類袖套中線粒體為16個,是一般硬骨魚類的4倍。紅鰭東方鲀[18]精子的袖套縱切僅有2個圓形線粒體,橫切有7~8個線粒體。各線粒體呈球狀環(huán)列于袖套腔四周。褐菖鲉[21]精子袖套約為頭部全長的1/2,線粒體分3~4層排列,每層10~11個,共約30~40個線粒。鯉魚[13]精子的袖套一側(cè)含多個線粒體和數(shù)個囊泡,另一側(cè)線粒體則較少,而云斑尖塘鱧精子的袖套之中也含有少量的囊泡。

      4尾部

      云斑尖塘鱧精子具有圓形頭頸部和細(xì)而長的尾部。這和同為塘鱧科的中華烏塘鱧[22]精子掃描電鏡的觀察相似,但是云斑尖塘鱧精子的尾部鞭毛(222~392μm)比中華烏塘鱧精子尾部鞭毛(15.5~17.5μm)要長一些。云斑尖塘鱧精子的尾部(鞭毛)軸絲具有典型的“9+2”型雙聯(lián)管結(jié)構(gòu),而長薄鰍等[23]的尾部則為“9+3”式微管結(jié)構(gòu)。云斑尖塘鱧尾部軸絲兩側(cè)有比較發(fā)達(dá)的側(cè)鰭。有些魚類精子尾部也有側(cè)鰭,如褐菖鮋、長吻、黃顙魚、平鯛、紅鰭東方鲀等。但有些魚類則無側(cè)鰭,如鯉魚、刀鱭[24]等。鞭毛是精子的運(yùn)動器官,側(cè)鰭的有無能否影響精子的游泳速率,從而影響受精效率,不同學(xué)者有不同的看法:Stoss[25]認(rèn)為側(cè)鰭可能改善精子鞭毛的游泳速率,有利于提高受精率。而Afzelius[26]則認(rèn)為側(cè)鰭與精子游泳速率的提高無多大關(guān)系。云斑尖塘鱧精子鞭毛近末端,軸絲解體,失去典型的“9+2”模式。在尾部偏末端的縱切面上,我們觀察到外周的二聯(lián)微管先消失,只剩下中間的一組微管對,在最末端中間的微管也逐漸消失。鞭毛最末端細(xì)而且長。沒有見到像大黃魚[27]精子尾部的簍狀結(jié)構(gòu)。

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