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本文作者：周路球馬真石小峰尹夕龍賈軍糾智松陳國昌孫大勇作者單位：廣東省深圳市龍崗中心醫(yī)院神經(jīng)外科

腦出血是腦外科情況最危急、預(yù)后也較差的疾患之一，若出血破入腦室還會(huì)形成血腫，造成梗阻性腦積水，引起急性顱內(nèi)壓增高，使患者癥狀迅速惡化，出現(xiàn)腦疝死亡，經(jīng)搶救存活的患者也常常遺留肢體和語言功能障礙，嚴(yán)重威脅著患者的身體健康及生命質(zhì)量［1］。創(chuàng)傷后免疫功能的改變可以影響機(jī)體的防御功能和康復(fù)效果。紅細(xì)胞除了具有其基本的生理功能外，在機(jī)體免疫及防護(hù)方面也起到極為重要的作用。本次研究通過觀察腦外傷后患者血液中紅細(xì)胞免疫促進(jìn)因子、免疫抑制因子及T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）免疫黏附功能的變化及規(guī)律，了解其與預(yù)后的關(guān)系，為今后臨床病情判定、預(yù)后的預(yù)測提供依據(jù)。

1對象與方法

1.1研究對象

選取2010年1月～2011年9月到我院就診的腦出血患者64名作為病例組。所有患者的診斷依據(jù)第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］，同時(shí)配合CT或MRI檢查結(jié)果，由兩名主治醫(yī)生及以上的醫(yī)師確診。病例組腦出血部位分布情況：基底節(jié)38例（59.38%）、腦葉15例（23.44%）、腦干6例（9.37%）、小腦5例（7.81%）。神經(jīng)功能的損傷程度劃分標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《腦卒中患者臨床神經(jīng)功能缺損程度評分標(biāo)準(zhǔn)》［3］，分為輕度20例（31.25%）、中度26例（40.63%）、重度18例（28.12%）。以年齡、性別為匹配條件，選擇健康家屬60例作為對照組。所有的研究對象均簽署知情同意書，并且調(diào)查前2周未使用免疫增強(qiáng)劑及免疫抑制劑，排除有可能引起免疫異常的疾病。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑

采用美國Beckman-coulter公司的EpicsImmunologyWorkstation流式細(xì)胞分析儀。試劑也采用美國Beckman-coulter公司的三色單抗、生物標(biāo)記抗小鼠IgG及標(biāo)準(zhǔn)熒光微球。

1.2.2檢測方法

取研究對象清晨空腹靜脈血2ml置于干燥管及抗凝管中混勻，將干燥管中的標(biāo)本參照文獻(xiàn)［4］提供的方法對紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率（RBC-C3bRR）、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花環(huán)率（RBC-ICR）、紅細(xì)胞免疫促進(jìn)因子（RFER）、紅細(xì)胞免疫抑制因子（RFIR）進(jìn)行檢測。對抗凝管中的標(biāo)本進(jìn)行T細(xì)胞亞群的檢測，方法參考文獻(xiàn)［5］：每50μl標(biāo)本加入5μl的單克隆抗體，打開流式細(xì)胞儀及氬離子激光光源（488nm），預(yù)熱20min，儀器自動(dòng)初始化，用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球進(jìn)行光路與流路標(biāo)準(zhǔn)，所有熒光信號的變異系數(shù)（CV）均小于2%，在前向散射光（FS）和側(cè)向散射光（SS）散點(diǎn)圖中圈定細(xì)胞群，選擇淋巴細(xì)胞為分析對象，去除細(xì)胞碎片，用陰性對照確定熒光陰性范圍及PMT電壓標(biāo)準(zhǔn)，顏色補(bǔ)償，每份標(biāo)本測定5000個(gè)細(xì)胞，全部數(shù)據(jù)用流式細(xì)胞儀和軟件SYSTEMⅡ獲取和分析。

1.3統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料兩組間的比較采用t檢驗(yàn)，多組間采用方差分析，計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1研究對象一般情況分析

病例組平均年齡（38.78±11.56）歲，男女性別比為2.76︰1；對照組平均年齡（37.16±10.74）歲，男女性別比為3︰1。兩組的平均年齡及性別分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）。見表1。

2.2紅細(xì)胞免疫黏附功能及紅細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)因子比較

病例組與對照組RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.001）見表2；按照神經(jīng)功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）見表3。

2.3T細(xì)胞亞群比較

病例組與對照組CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）見表4；按照神經(jīng)功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）見表5。

3討論

腦出血在腦外科較為常見，常威脅患者生命，出血破入腦室還會(huì)形成血腫，造成梗阻性腦積水，引起急性顱內(nèi)壓增高，使患者癥狀迅速惡化，出現(xiàn)腦疝死亡，經(jīng)搶救存活的患者也常常遺留肢體和語言功能障礙，因此對病情及預(yù)后盡早判斷有非常重要的意義。腦出血后導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能變化，其機(jī)制一般認(rèn)為是由于腦出血可引起下丘腦-垂體-腎上腺軸功能活動(dòng)增強(qiáng)，產(chǎn)生大量的促腎上腺皮質(zhì)激素，通過其對外周血紅細(xì)胞或T淋巴細(xì)胞上的高親和力受體直接抑制免疫功能，促腎上腺皮質(zhì)激素能增強(qiáng)皮質(zhì)醇的生成，是免疫細(xì)胞活化的抑制劑，可以抑制細(xì)胞免疫［6］。

紅細(xì)胞最主要的免疫功能是免疫黏附作用，紅細(xì)胞表面存在C3b受體，可黏附循環(huán)中的抗原-抗體-補(bǔ)體復(fù)合物（IC），旁路激活黏附補(bǔ)體的抗原，使IC不易在組織中沉積，從而失去了沉積于血管內(nèi)皮細(xì)胞或基底膜所產(chǎn)生的致病性。紅細(xì)胞被認(rèn)為是對異物和IC起免疫黏附作用的主要細(xì)胞，紅細(xì)胞也參與機(jī)體免疫功能的調(diào)控［7］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，病例組與對照組RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；按照神經(jīng)功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度RBC-C3bRR、RBC-ICR、RFER及RFIR的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，屬于繼發(fā)性紅細(xì)胞免疫功能低下，其原因這可能是因?yàn)槟X出血患者血液中出現(xiàn)大量循環(huán)免疫復(fù)合物（CIC）。腦外傷出血部位釋放的抗原產(chǎn)生抗體、病原體等進(jìn)入血液，與紅細(xì)胞上的補(bǔ)體受體相結(jié)合，從而導(dǎo)致紅細(xì)胞清除免疫復(fù)合物能力下降，這些抗原抗體復(fù)合物也可沉積在腦血管網(wǎng)中，釋放血管活性物質(zhì)，引起腦血管痙攣，或激活補(bǔ)體系統(tǒng)加重腦血管的損害［8］。

此外，病例組與對照組CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，按照神經(jīng)功能損傷程度分層后比較，不同損傷程度CD3+、CD4+、CD8+及CD4／CD8的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，腦出血患者CD3+、CD4+、CD4／CD8低于對照組，并且隨病情加重下降趨勢更加明顯，提示腦出血患者細(xì)胞免疫功能隨病情的加重也逐漸下降。

綜上所述，腦出血患者的紅細(xì)胞免疫功能及T細(xì)胞免疫功能均出現(xiàn)降低，這些指標(biāo)對判斷病情嚴(yán)重程度及預(yù)后有一定的臨床意義。